桑黄发酵液总黄酮逆转sgc7901adr细胞多药耐药性研究

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1、分类号Ｒ２８５．５密级学号１２２１１４圓■ｙｆｉｌｉｉ—硕ｉ学位论文（学术型）题目桑黄发醇液怠黄ＳＧＣ７９０１／ＡＤ民细施ｉ同逆转多药耐药性研究作者高巧慧指导教师李发荣副教授—级学科名称中药学二级学科名称中药学提交二零一五年五月日期学位论文原创性声明本人声明所呈交的学位论文是我在导师的指导下进行研巧工作所取得的研巧成果。尽我所知，除文中已经注明引用的内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研巧成果，也不包含本人或他人己申请学位或其他用途使用过的成果

2、。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中作了明确说明并表示谢意。本学位论文若有不实或者侵犯他人权利的一切相关的法律责，本人愿意承担任。焉巧接■作者签名：．日斯夕年５月又王日学位论文知识产权及使用授权声明书本人在导师指导下所完成的学位论文及相关成果，知识产权归属陕西师范大学。本人完全了解陕西师范大学有关保存、使用学位论文的规定，允许本论文被査阅和借阅，学校有权保留学位论文并向国家有关部口或机构送交论文的纸质版和电子版，有权将本论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可抖采用任何复制手段保存和汇编本论文。本

3、人保证毕业离校后，发表本论文或使用本论文成果时署名单位仍为陕西师范大学？保密论文解密后适用本声明。作者签名：烏巧髮曰期：如／５年左月给曰摘要依据传统中医药理论，桑黄（如ｅ抓侃ｆｅｗ）性甘、平，味辛，归肝、膀腕经、、、、保。现代药理研究发现，桑黄具有抗肿瘤増强人体免疫力抗炎抗氧化肝及防止肝纤维化等作用。术后进行化疗或放疗，并同时服用桑黄，可Ｗ减轻患者的诸如食欲降低、呕吐、高热、脱发等副作用，强化患者的免疫系统，抑制残。，留肿瘤细胞的转移，相应改善末期癌症患者的各种症状目前野生桑黄资源匿乏。而市场对桑黄的需求驱动了桑黄人

4、工栽培技术的进步研究表明，人工培养桑黃的多种有效成分与野生桑黄无异。一本深题桑黄菌丝体发酵液提取物桑黄发酵液总黄酣（Ｔｏｔａｌｆｌａｖｏｎｏｉｄｓｆｒｏｍ户Ａｅ化ＰＬＴＦ）为实验药物，研巧其对人胃癌ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细胞耐药性的逆转作用，并探讨其可能的逆转机制，为传统中荡桑黄在临床肿瘤治疗上提供更全面的理论依据。。本课题首次对桑黄总黄爾的耐药逆转及其机制进行了探讨主要研究方法及结果如下：（１）采用ＭＴＴ比色法检测人胃癌ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细胞对阿霉素（Ａｄｒｉａｍｃｉｎｙ，ＡＤＲ）的耐药倍数７９０１／ＡＤＲＡＤＲ的耐１

5、２６．７７。，结果显示ＳＧＣ细胞对药倍数为倍ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ光学湿微镜下观察胃癌细胞形态，ＳＧＣ７９０１细胞近乎为圆形；细胞．近乎为长梭形，并且细胞间拔丝样结构増多，细胞间连接较敏感细胞多。（２）采用ＭＴＴ比色法进行ＰＬＴＦ对ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细胞的细胞毒性实验，结果显示ＰＬＴＦ的ＩＣ２０、１〇５〇值依次为８６．４６ｊｉｇ／ｍＬ、３０２．５７ｆｉｇ／ｍＬ。本实验选择ＰＬＴＦ对ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细胞增殖抑制率小于２０％的药物浓度作为非细胞毒性浓度。选用ＰＬＴＦ的浓度梯度为２０＾ｌｇ／ｍＬ、４０ｌ／ｍＬ、８〇ｎｇ／ｍ

6、Ｌ，进斤后续实验。＾ｇ（３）采用ＭＴＴ比色法检测非细胞毒性浓度的ＰＬＴＦ对ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细胞耐药性的逆转作用。结果显示，用ＰＬＴＦ作用ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细胞４化后与ＡＤ民联用，ＡＤＲ的１（：５〇值随着ＰＬＴＦ浓度（２０［ｉｇ／ｍＬ、４〇ｎｇ／ｍＬ、８（Ｈｉｇ／ｍＬ）的增大而减小．８９、５．０９、６．４１浓度依赖性。，逆转倍数依次为２，且呈（４）采用流式细胞术（Ｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ，ＦＣＭ）检测ＰＬＴＦ对ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲＰ－。ＰＬＴＦ处理ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细胞比，细胞糖蛋白功能或表达量的影响结

7、果显示，ＰＬＴＦＰ－细胞内Ｒｈｌ２３癸光强度较正常对照组无显著性差异，表明对细胞糖蛋白的功能无影响；ＰＬＴＦ处理ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ细施４化，细胞内ＲＭ２３焚光强度随着ＰＬＴＦ浓度（２０ｌ／ｍＬ、４０ｉ／ｍＬ、８０ｉ／ｍＬ）的增大而增强，蓄积倍数依次为８．１９、＾ｇｐｇ＾ｇＩ９－．４４、１１．０３，推测ＰＬＴＦ可能抑制了Ｐ糖蛋白表达。ＰＬＴＦ处理ＳＧＣ７０１／ＡＤＲ细胞３化后加入ＡＤＲ（６ｉ／ｍＬ），结果显示随着ＰＬＴＦ浓度的増加，细胞内ＡＤＲ蒙光ｆｇ强度明显増加，即ＰＬＴＦ促进了细胞内ＡＤＲ的蓄积。－（５）采用半定量ＲＴＰＣ

8、民检测ＰＬＴＦ对ＳＧＣ７９０１／ＡＤＲ