亚洲百合无花粉性状相关的srap标记研究

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1、分类号S722学位代码309.密级GK学校代码10298学号3120425态京林戒大学研究生硕士学位论文论文题目：亚洲百合无花粉性状相关的SRAP标记研究作者：王帅专业：林木遗传育种研究方向：观赏植物育种指导教师：席梦利教授二〇一五年六月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行的研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中已经特别注明引用的内容和致谢的地方外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式注明并表示感谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（本人签名）：力v

2、r年6月《曰学位论文出版授权书本人及导师完全同意《中国博士学位论文全文数据库出版章程》、《中国优秀硕士学位论文全文数据库出版章程》（以下简称，程'见WWW.cnki.net),愿意将本人的学位论文提交“中国学术期刊（光盘版）电子杂志社”在《中国博士学位论文全文数据库》、《中国优秀硕士学位论文全文数椐库》中全文发表和以电子、网络形式公开出版，并同意编入CNKI《中国知i只资源总库》，在《中国博硕士学位论文评价数据库》中使用和在互联网上传播，同意按“章程”规定享受相关权益。论文密级：□4^开□保密（_年_月至__年_月）（保密鲶考像讼式在斛密后右遂守此你试）作者签名：工你导师签名：爲越叫又年

3、Z月/^曰年_i_月」日致谢本文是在恩师席梦利教授的悉心指导下完成的。从论文的选题、研究方案的定制、论文的修改和定稿，无一不倾注着席老师大量的心血。恩师在学术上的严谨思维以及睿智大度的处事风格从学识上、人生上都给予学生以极大的启迪，是值得终身铭记的。值此论文即将付梓之际，我谨代表我及我的家人向恩师致以真诚的谢意！特别感谢施季森教授在论文的选题、实验工作的开展到论文的撰写方面给予的宝贵意见！施老师渊博的知识、严谨的治学态度、活跃的学术思想和忘我的工作精神无时不在感染着我，使我终身受益。感谢杨立伟老师对我实验的指点和帮助！感谢陆叶老师在试剂和易耗品的领用上为我提供的极大便利！在论文的开题与实

4、验过程中，也得到了以下诸多老师的帮助和支持，他们是黄敏仁教授、王章荣教授、尹佟明教授、徐立安教授、诸葛强教授、季孔庶教授、李火根教授、童春发教授、陈金慧教授、徐进教授、潘惠新教授、陈英副教授、甄艳副教授、边黎明副教授、程强副教授、胥猛副教授以及刘光欣老师，在此一并表示衷心的感谢！同时感谢实验室的博士邱帅、徐阳、沈捷；硕士方忆灵、张晓玲、孙惠霖、高婷婷、钱洪彬、房磊；学士邵敏等师兄弟姐妹在论文完成过程中给予的诸多支持和帮助。感谢赵亚琦、龙晓飞、闫姗、董京、欧佳佳、王建文、周琦、苏江、徐俊杰、朱燕宇、马雪迎等我的同窗好友。感谢王德源、王新民、顾胤聪等我的室友在学习、生活中给予的关心和支持。特

5、别感谢我唯一的同门辛昊阳师弟一直以来给予的无微不至的关心！感谢因为选择读研究生所失去的一切，正是因为他们的离开让我懂得了什么才是最应该珍惜的，谢谢他们让我变得更加成熟和稳重。最后，特别感谢我慈祥的奶奶、忠厚的父母以及善良的哥哥和嫂子。三年来，是他们为我排除了一切后顾之忧，使我能全身心地投入学习。他们不仅在生活上给予我无尽的关怀，同时在遇到挫折的时候，给了我战胜困难的勇气和信心。这篇论文的完成凝聚了无数人的汗水，再次感谢所有给予我帮助的人们！作者：王帅二〇一五年六月于南林摘要由于百合花粉污染问题严重，培育少花粉或无花粉百合新品种已成为国内外百合育种的主攻方向之一。本研究以亚洲百合‘H08-

6、03’(♀,无花粉发育)与‘Pollyanna’(♂,花粉正常发育)杂交创制的新种质为试验材料，对其育性遗传规律进行初步探讨，并采用BSA法构建无花粉基因池和有花粉基因池，结合SRAP标记技术，筛选与亚洲百合无花粉性状连锁的分子标记。主要研究结果如下：2+1.亚洲百合SRAP-PCR反应体系的建立。通过正交直观分析，确定Mg、Taq酶、模板DNA三因素对PCR反应的影响较大，对这三个因素进行梯度实验后，最终确定了适用于亚洲百合的SRAP-PCR反应体系：20μL体系中，模板DNA约50ng，1×PCRBuffer，2+2.8mmol/LMg，0.5mmol/LdNTP，上下游引物均为0.

7、7μmol/L，Taq酶1.5U，不足部分以双蒸水补足。最佳反应程序为：94℃预变性5min；前5个循环中，94℃变性1min，35℃复性1min，72℃延伸1.5min；后30个循环中，复性温度变为54℃；最后，72℃延伸8min。2.无花粉性状的遗传分析。对‘H08-03’בPollyanna’和‘GoldenHorn’בPollyanna’杂交2群体的花粉有无的分离数据进行适合性检验。证实子代分离现象符合孟德尔遗传分离定