黄瓜f基因的srap分子标记

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1、西南农业大学硕士学位论立摘璺黄瓜，基因的SRAP分子标记硕士研究生：郭素英指导教师：张兴国研究员(西南农业大学园艺园林学院，重庆市蔬菜学重点实验室，重庆400716)摘要黄瓜(CHcumissativusL．)啄产子印度jt部、喜马控雅dj脉的库曼锔金一带，后被引种到世界各地，于公元二世纪从中亚传入我国16J。黄瓜是一种喜温暖，不耐寒冷的一年生蔓性草本植物，以幼嫩的果实供食．其营养丰富15I。随着设施园艺的发展，对全雌性黄瓜品种的需求日益增加。性别分化是植物个体发育的重要阶段，其分化机理的阐明不仅在发育生物学中具有重要的理论意义，而且具有极为重要的实用价值【lOl。雌花发生的

2、早晚及其分布状态，即性型表现，与黄瓜成熟早晚，产量和品质等有密切的关系。由于种类和品种的不同，以及易受环境条件的影响，黄瓜在性别表现方面有显著的差异，因此．在目前季节栽培已经高度分化的情况下，控制性别表现，便具有重要的意义。遗传标记．尤其是近年来快速发展起来的蛋白质和分子标记技术，在植物的机理研究中起着越来越重要的作用001．黄瓜全雌性品系在简化杂交制种，降低制种成本，提高产量等方面均具有重要的作用。，基因部分显性。控制雌性发育，与全雌性连锁的分子标记辅助育种将加速全雉品系的获得．对黄瓜基因进行研究，可为进一步的分子育种打下基础，但由于种内资源的有限，利用基因工程将是今后黄瓜

3、品种改良重组远缘有用基因的有效手段。一、黄瓜性别分化的遗传分析由基因型为FFMMAA的纯雌株母本与基因型为明协加的纯雄株父本杂交得到Fl代，F1代经自交得到F2代，F2代种植225抹。对植株主茎上前25个节位进行雌雄花数统计，根据每株雌雄花数比例，雌雄花数比例小F10％的定为强雄株，雌花数是雄花数lO倍以上的定为强雌株，25节位上都是雌花为纯雌株，都是雄花的为纯雄株，其余的定为雌雄同株。得到强西南农业太学硕士学位论文摘要雌性植株28个，纯雌植株28个，强雄性植株56个，纯雄植株4个，雌雄同株109株，将强雌株和纯雌株合并为雌性株；强雄株和纯雄株台井为雄性株。雌性株，雌雄同株，

4、雄性株的比例接近于1：2：1。二、黄瓜基因组DNA的提取采用改良的CTAB法，提取基因组DNA，用TE溶解后，经1％琼脂糖凝胶电泳检测：黄瓜基因组DNA带型整齐、清晰，大小在23kb左右。经紫外分光光度计测定，其浓度满足实验的需要。三、基因组DNA池的构建将雌性植株与雄性植株提取DNA后，测定其浓度。采用集团分离分析法(bulkedsegregantanlysis，简称BSA)在F2分离群体中挑选纯雌株和纯雄株，按浓度将14株纯雌株等量混合，构建雌性DNA池；将4株纯雄株与3株强雄株等量混合构建雄性DNA池-四、SRAP分子标记的数据统计与分析用62对$RAP扩增引物分别对黄

5、瓜雌性基因组池和雄性基因组池进行PCR扩增，经l％琼脂糖凝胶电泳检测，其扩增结果是～条较宽较浓或多条较浓的带，符台4％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的要求。经过4％变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的分离，凝胶的固定、染色、显色后．共得到3125条带，平均每对引物扩增出20～30条带。其中具有差异带(雌性植株有而雄性没有的)的引物共有14对。从上述14对引物中选择其中一对引物对F2代单株进行PCR扩增，聚丙烯酰胺凝胶分离扩增片段，在发现有在植株Cs0404．7中发现一条差异带。关键词：黄瓜(Cucum／ssativusL．)性别分化相关序列扩增多态性F基因Ⅱ嚣南农业大学硕士学位论文Abstrac

6、tTheSRAPMolecureMarkerofFGeneInCucumberSupervisor：ProfessorZhangXingguoCandiate：GunSuying(KeyLabinVegetableResearchofChongqing，CollegeofHorticultureandLandscape,SouthwestAgriculturalUniversity,Chongqing,China,400716)AbstractCucumber(CucumissativusL．)originatedfromthenorthernpartofIndia，Sout

7、hoftheHymalays，ItwascultivatedallovertheworldandspreadtoChinafrommiddleAsia161．Cucumberisakindofannualclimberplantthatlikestogrowinwarmcondition．Thecucumberoffersthefoodwiththeyoungandtenderfruit；itisnutritious15

8、．Withthedevelopmentofprotectedhorticultur