骨髄间充质干细胞与软骨细胞共同培养复合可注射性改良纤维蛋白凝胶支架修复兔膝关节软骨缺损的实验研究

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1、中困分类号ｉＲ３３６＜庐＊）度＾乂聲ＳＩＣＨＵＡＮＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕：ｔ学位论文？—、骨髓间充质干细施与软胥细胞共同培养复合可注射性改良纤维蛋白凝胶支架修复兔膝关节软骨缺损的实验研究院（系）、所临床戾举院研巧生姓名肖振宇．－．－学科、专业外科学导师姓名王跃教巧‘．ｙ—＾－之二―二ｏ—五年五月＇—‘．．：．－．＾．＾巧／；．海？－－Ｖ－．、．ｒ／＇’气－．－‘、．■＇．；－户叫．、．：＇■八ｒ■■■、、■，？、？

2、－、．－－＞．、、．＇？Ｓ．＾：公四川医科大学硕主学位论义目录１骨髓间充质干细胞与软骨细胞共同培养复合可注射性改良纤维蛋白凝胶支架修复兔膝关节软骨缺损的实验研究３１．１中文摘要３１．２英文摘要５１．３前言６一２１１实验：关节软骨细胞、骨髓间充质干细胞的分离和培养２．１材料与方法１１２．２结果１８３实验二：骨髓间充质干细胞与软骨细胞共同培养复合可注射性改良纤维蛋白凝胶支架修复兔膝关节软骨缺损２２３．１材料与方法２２３．２结果３２４讨论４１５结论４３６参考文献

3、４４４８７英文缩略语８致谢４９９综述：可注射性纤维蛋白凝胶支架在沮织工程化软晉中的研究进展巧－２－四川医稱大学硕主学位论文骨髓间充质干细胞与软骨细胞共同培养复合可注新性改良纤维蛋白凝胶支架修复兔关节软骨缺损的实验研巧中文摘要目的：探讨Ｗ骨髓间充质干细胞（ＢＭＳＣｓ）与软骨细胞按３：１比例共同培养作为种子细胞，复合改良纤维蛋白凝胶支架，在成年兔体內诱导形成软骨，修复软骨缺损的可能性。方法：过量麻醉化死１周大的日本大耳兔，Ｗ全骨髓贴壁培养法分离培养ＢＭＳＣｓ；ＩＩ型胶原蛋白酶消化分离幼兔膝、肘关节末端软骨

4、细胞。取第３代ＢＭＳＣｓ和第１代关节软骨细胞，按３：１的细胞密度混合后与改良纤维蛋白凝胶支架复合。取４８只成年日本大耳兔，用电钻在双侧膝关节的股骨滑车中间制造直径５ｍｍ、深４ｍｍ的全层软骨缺损模型，将４８只日本大耳兔随机分为Ｈ组；实验组，缺损处注入改良纤维蛋白凝胶与种子细胞复合物；对照组，缺损处注入改良纤维蛋白凝胶，缺损旷置。分别在术后６周、１２周取材，；空白姐从大体观察、Ｗａｋｉｔａｎｉ评分、姐织学观察（ＨＥ染色）、免疫组化、蛋白聚糖（ＧＡＧ）含量检测等方面评估关节软骨缺损的修复情况。结果：２周后缺损处己被新生修复：大体观察及组织

5、学观察实验组１组织覆盖，修复组织类似关节软骨，Ｗ透明软骨为主，与缺损周围软骨组织边界模糊不清；对照组的修复组织不能完全修复软骨缺损，透明软骨含量较少，与缺损周围软骨组织边界较清楚；空白组修复效果不佳，Ｗ疮痕组织修复为主。结论１、：改良纤维蛋白凝胶支架生物相容性好，降解速率适宜，不．－３－四川医釉大学硕±学化论文引起机体产生炎性反应，软骨细胞在其中能够正常増殖和分泌基质，是作为可注射性细胞支架较为理想的选择。２、第３代ＢＭＳＣｓ与第１代软骨细胞、改良纤维蛋白胶构建的细胞支架复合物可通过注射的方式完美填补软骨缺损，术后１２周即可

6、很好地修复全层关节软骨缺损。关键词：ＢＭＳＣｓ、软骨细胞、改良纤维蛋白凝胶－４－四川医稱大学硕±学位论文ＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｄｉｓｃｕ巧ｉｏｎｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆＢＭＳＣｓａｎｄｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓａｒｅｃｕｌｔｕｒｅｄｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｊｒｏｏｒｔｉｏ打ｏｆ３：１ａｓｓｅｅｄｃｅｌｌｓｃｏｍｏｓｉｔｅｍｏ姐巧ｅｄｆｉｂｒｉｎｅｌｓｃａｆｏｌｄ化ｉｎｄｕｃｅｔｈｅｐｐ，ｐｇ，ｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｃａｒｔｉｌａｇｅｉｎａｄｕｌｔｒａｂｂｉｔｓｔｈｅ

7、ｏｓｓｉｂｉｌｉｔｏｆｒｅａｉｒｏｆｃａｒｔｉｌａｅｄａｍａｅ．，ｐｙｐｇｇＭｅｔｈｏｄｓ：Ｗｅｒｅｋｉｌｌｅｄｂｙｏｖｅｒｄｏｓｅａｎｅｓｔｈｅｓｉａｏｆ１ｗｅｅｋｏｌｄｒａｂｂｉｔｓ，ｓｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｏｆＢＭＳＣｓｂｙｗｈｏｌｅｂｏｎｅｍａｒｒｏｗａｄｈｅｒｅｎｔｃｕｌｔｕｒｅｍｅｔｈｏｄｓｅａｒａｔｉｏｎｏｆｒａｂｂｉｔ；ｐｋｎｅｅａｎｄｅｌｂｏｗｊｏｉｎｔｃａｒｔｉｌａｇｅｃｅｌｌｓａｔｔｈｅｅｎｄｏｆｔｙｐｅ２ｃ