番鸭细小病毒和鸭甲肝病毒3型广西株全基因序列分析及其分子生物学诊断方法的建立

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3、分子生物学诊断方法的建立赵化专业学位名称兽医硕±指导教师谢芝就研究员论文答辩日期２０１５年５月巧日学位授予日期答辩委员会主席何秀苗教授Ｉ广西大学学位论文原御性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研巧所取得的研究成果。除己特别加标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人一为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均己在论文中作了明确说明。本人在导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品

4、，知识产，即；权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权学校有权保存并向国家有关部口或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可Ｗ采用影印、缩印或其它复制手段保存。、汇编学位论文本学位论文属于：□保密。，在年解密后适用授权保密。＂＂（请在［＾上相应方框内打Ｖ）论文作者签名：毛卖王日期；指导教师签名：日期电子邮箱：作者联系电话；番鸭细小病奉和鸭甲肝病毒３型广西株全基因序列分析及其分子生物学诊断方法的建立摘要番鸭细小

5、病毒病是由番鸭细小病毒ＭＤＰＶ引起的引起的主要感染Ｈ（）周龄Ｗ内维番鸭的一种病毒性传染病，维鸭感染后可产生肠道卡他性炎症、拉稀腹湾、两脚发软等症状，严重危害了番鸭饲养业的发展。目前，番鸭细小病毒病在我国福建、广东、广西等主要番鸭饲养区广泛流行。鸭甲型病毒性肝炎是由鸭甲肝炎病毒一（ＤＨＡＶ引起的种传染性强致）死率高的传染病，主要侵害Ｈ周龄［＾内维鸭。ＤＨＡＶ根据血清型分为ＤＨＡＶ－－－１型、ＤＨＡＶ２型和ＤＨＡＶ３型，分别对应于原来的血清Ｉ型ＤＨＶ、最早发现＂＂＂＂于台湾的新型ＤＨＶ和最早发现于韩国的新型ＤＨＶ。随着我国养鸭业的发展，鸭肝炎

6、的发病率和死亡率越来越高，严重制约了养鸭－－业的发展。近年来，在我国流行的ＤＨＡＶ主要为ＤＨＡＶ１和ＤＨＡＶ３。－为从分子水平上了解广西流行株ＭＤＰＶ和ＤＨＡＶ３的遗传变化规律，本研巧应用ＰＣ民方法扩增了广西分离株ＭＤＰＶＧＸ２０－－１１５和ＤＨＡＶ３ＧＸＬＺ０７的不同核酸片段，对其进行了全基因组序列测定与分析。结果表明－５全基因序列与ＧｅｎｅＢａｎｋ公布的其他ＭＤＰＶ株的相似性介，ＧＸ２０１１－？于９０．５％９４．３％之间ＳＨＮＨＭ，与上海ＳＡＡＳ株的相似性最商，与匈牙利Ｆ株的相似性为最低；与鶏细小病毒（ＧｏｏｓｅＰａｒｖｏｖｉｒｕｓ，

7、ＧＰＶ）的相似性介于Ｉ８？１．４％９１．４％之间，其中与重庆ＤＹ株相似性最高，与匈牙利ＶｉｒｕｌｅｎｔＢ株－３其它毒株全基因序列相似性最低。ＧＸＬＺ０７株全基因序列与ＤＨＡＶ相似？性介于９５．１９９．３％之间，与福建Ｇ株相似性最高，与北京Ｂ６３株相似性最低。－ａｎｋ－根据ＧｅｎＢ中鸭甲肝病毒１型（ＤＨＡＶ１）的３Ｃ基因和ＤＨＡＶ３的ＶＰＯ基因分别设计了２对特异性引物，并优化扩增条件，建立了鉴别ＤＨＡＶ－－３二二温－ＰＣ艮１和ＤＨＡＶ重式民Ｔ的检＊１方法。该方法特异性好，－对其他鸭病原体无持异性扩增