慢性心理应激影响大鼠细胞自噬功能的时相性研究

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1、10572分类号R22学校代号UDC610密圾公开学号20121104331@户抑[中度為夫聲icineGuanzhouUnitofChineseMedgiversy硕±学位论文慢性也理应激影响大鼠细胞自儀功能的时巧性研究学位申请人^指导教师姓名巧海清专业名觀中區学申请学位类型科学学位论文提交日期2015年4月广州中医药大学学位论女原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是个人在导师的指导下,独立进行研究工

2、。作所取得的成果除文中邑经特别加W往明引用的内容外,本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中W明确方式标明并致谢。。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担学位论文作者盜名_^'日期:wi年乏月又日!关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定,同意学校巧留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版,允许被查阅和借阁。本人授权广州中医药大学可W将本学位论文的全部或部分内容编

3、入有关数据库进行检索,可W采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论义作者嫁名、论文导师签务日期:苹f月日本研究属广东省高等学校高层次人才项目-从细胞自嗟探讨肝主疏泄功能实质A-1AFD004132A04。的研究,项目编号:摘要目的;把慢性也理应激与中医情志病験系起来,根据中医走情内伤,最先伤肝的病因理论,观测比较不同的慢性也理应激时间所导致的病位演变及证候变化规律,W及海马神经细胞一、肝细胞等体细胞内自隆活动的变化情

4、况。为下步中医药抗应激损伤的动物实验研巧摸索最佳造模时间,也为从细胞自處角度阐释肝主疏泄的藏象理论提供实验依据。方法;根据旷场实验5分钟活动距离,大鼠随机分为空白组、造模10天组、造模20天组、造模30天组和造模40天组5组,六种造模方法(禁食、禁水、冰水游泳、、电击、理应激模型的夹尾、束缚)随机豪排在实验过程中,W旷场实验判断慢性屯建立舟间,酶联免疫法分析大鼠血清胃动素、胃泌素,慢性也理应激对大鼠海马CA1、区神经细胞自嗦体的影响,慢性屯理应激对大鼠海马神经细胞、肝细胞自

5、隧相关蛋白表达的影响。结果:1、慢性也理应激对大鼠空间记忆及学习能力和抑郁情绪的影响各组大鼠造模前旷场实验活动总路程无差异(/^0.05)。造模后,与空白组相比,5分钟活动总路程造模10天组距离缩短,但无差异(/>0.05);造模20天组活动距离明显缩短,有差异(/<0.05);造模30天组、40天组活动距离缩短,有,<明显差异(/〇.01)。前3分钟活动总路程,与空白组相比,造模10天组活动距离缩短,有差异(片<〇.05);造模20天组、造模30天姐、40天组活动距

6、离明显缩短,有显著差异(尸<0.01)。2、、慢性屯理应激对大鼠胃肠激素的影响各组大鼠造模结束后取血,测定血清胃动素、胃泌素,与空白組相比,造模10天组血清胃动素下降.05造模20天组、30、40,有差异(P<0);天组天组胃动素(<)下降明显,有显著差异/0.01。与空白组比较,造模10天组、20天组血清胃泌素下降,但无差异(/>0.05);造模30天组、40天组下降明显,与空白组相比><有差异(/〇.05)。而且随着造模时间的延长,大鼠血清胃肠激素呈逐步下降趋势。3

7、、慢性也理应激对大鼠细胞自隆相关指标表达的影响3.1慢性也理应激对大鼠细胞自嗟相关蛋白TS巧的影响各组大鼠造模结束后取材进行倒置显微镜观察,免疫组化染色后细胞质显示黄I,造模10天组与空白褐色,核呈现蓝色。空白组大鼠海马区显示,黄色区域分布少组相比阳性表达率上升,但无差异(尸>化05);造模20天组与空白组阳性表达率<相比,上升,有差异(户0.05);空白组与造模30天组、40天组相比有显著差<011异(尸.0)。空白组大鼠肝索清楚,细胞形态清晰,造模0天姐与空白组相比>0

8、20阳性表达率上升.05)模3040,无差异(戶;造天组、天组、天组与空白组相比有显著差异(戶<化01)。3、理应激对大鼠细胞自唆相关蛋白ULK1.2慢性屯的影响海马神经细胞中化K1的表达,造模10天组与空白沮相比阳性表达率上升,但无差异(戶>0.05),造模20天组与空白组阳性表达率相比,上升,有差异(戶<0.05);空白组与造模30天组、40天组相比有显著差异(户<0.01)。空白组大鼠肝索清楚

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