调肝健脾法影响慢性心理应激大鼠自噬功能的初步研究

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1、附2：声明广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名脚日期：20lg．年多月f日关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中

2、医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。(保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名j雌论文导师签日期：≯f垆年多月-i一日摘要目的：近年来，社会生存环境和生活模式不断发生变化，人们生活压力的日益增大，工作节奏不断加快，各种社会应激加剧，长期慢性心理应激作用下导致的机体生物化学功能失常的相关性疾病发病日益增多，慢性心理应激损伤已成为威胁人们身心健康的超级隐患，慢性心理应激相关疾病已成为生物学研究界的重要课题。细胞自噬是近年来细胞生物学领域的研究热点，作为细胞生存

3、的一种自我保护机制，在很多生理过程如降解异常折叠蛋白，清除损伤、衰老细胞器等发挥重要作用。白噬过度或者障碍造成的细胞损伤或诱导的程序性细胞死亡在肿瘤、神经退行性病变、心血管系统疾病、微生物感染、衰老等细胞增殖和凋亡发生紊乱的疾病过程中发挥着重要作用。从慢性心理应激的研究中发现，细胞自噬与慢性心理应激有着密切联系，慢性心理应激损伤可导致细胞自噬过度激活，细胞白噬行为的改变是慢性心理应激损伤的一种重要机制。目前，有关慢性心理应激激发细胞自噬的具体机制尚不十分清楚。慢性心理应激损伤属于中医情志内伤病因的范畴，中医藏象理论认为，肝主疏泄调畅气机对

4、于调节人体的情志活动具有重要意义。因此，从细胞自噬角度研究慢性心理应激损伤的机制对于丰富中医肝藏象及情志病因理论，探索调肝方药防治慢性心理应激损伤相关疾病的作用机制具有重大意义。方法：以8周龄SD成年大鼠为研究对象，采用慢性多相性应激(电击、夹尾、禁食、束缚、禁水、冰水游泳)建立慢性心理应激大鼠模型。观察调肝治法对慢性心理应激大鼠的空间探索、学习记忆能力及焦虑情绪的影响；调肝治法对慢性心理应激大鼠海马CAl区神经细胞自噬体的影响；调肝治法对慢性心理应激大鼠的海马神经细胞及肝细胞自噬相关信号蛋白表达的影响。结果：1、调肝治法对慢性心理应激大

5、鼠的空间学习记忆能力和焦虑情绪的影响1．1体重各组大鼠体重实验前未见差异(P>O．05)，在实验过程中体重均有不同程度的增长，造模30天当中，空白组大鼠体重增长最快，慢性心理应激模型大鼠体重增长相对缓慢，应激加加减逍遥散组体重增长最缓慢，应激加自拟方高剂量组体重增长相对其他应激组增长要快。经统计分析造模后各组大鼠体重，与空白组相比较：应激组、应激加自拟方低剂量组、应激加加减逍遥散组、应激加自拟方高剂量组有显著差异(P<0．01)，体重比空白组要轻；与应激组相比：空白组、应激加加减逍遥散组和应激加自拟方低剂组和应激加自拟方高剂组未见差异(P

6、>O．05)，应激各组大鼠体重相似。1．2旷场实验各组大鼠实验前旷场实验运动总路程未见差异(P>O．05)，造模后大鼠运动总路程，应激组、应激加自拟方低剂量组与空白组有显著差异(P<0．01)，与空白组相比明显要短；应激加加减逍遥散组、应激加自拟方高剂量组与空白组未见差异(P>0．05)，总路程与空白组接近。与应激组相比，空白组和应激加自拟方高剂组有显著差异(P<0．01)，比应激组大鼠运动总路程明显要长；与应激加加减逍遥散组比较，应激组有差异(P<0．05)，比应激组大鼠运动总路程长；与应激加自拟方低剂组未见差异(P>0．05)，两组数

7、值接近。造模前，大鼠中央区运动路程没有明显规律，且样本差异大，离散度大，应激组运动路程最长，但统计分析无差异。造模结束后，空白组与应激组比较有差异(P<0．01)，空白组大鼠比应激组大鼠要长，与其他组数值比较接近，未见差异(P>O．05)。1．3Morris水迷宫实验各组大鼠在实验过程中逃避潜伏期不断缩短，造模后水迷宫实验第1天各组大鼠平均潜伏期未见明显差异(P>0．05)。造模后第2天与空白组相比较，应激组大鼠平均潜伏期明显延长(P<0．05)，应激加自拟方低剂量组大鼠也明显延长(P<0．01)。造模后第3天与空白组相比较，应激组和应激

8、加自拟方低剂量组平均潜伏期明显延长(P<0．01)；与应激组比较，空白组和应激加加减逍遥散组与应激组大鼠有明显差异(P<0．01)。造模后第4天与空白组相比较，应激组大鼠平均潜伏期明显延长(P