饥饿时相对大鼠大脑皮质自噬的影响

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1、中图分类号：R363论文编号：HBLG2015-227UDC：密级：公开硕士学位论文饥饿时相对大鼠大脑皮质自噬的影响作者姓名：褚迎欣学科名称：麻醉学研究方向：麻醉与危重症医学学习单位：华北理工大学学习时间:3年提交日期：2015年5月7日申请学位类别：临床医学硕士导师姓名：张小平教授单位：华北理工大学附属医院论文评阅人：贾慧群教授单位：河北医科大学第四医院张树波副教授单位：华北理工大学附属医院论文答辩日期：2015年6月8日答辩委员会主席：姜保国教授关键词：自噬；饥饿时相；大脑皮质；LC3；Beclin1唐山华北理工大学2015年6月Effectsof

2、StarvationTimePhasesonAutophagyinCerebralCortexofRatsDissertationSubmittedtoNorthChinaUniversityofScienceandTechnologyinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofMedicinebyChuYingxin(Anesthesiology)Supervisor:ProfessorZhangXiaopingJune,2015独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师

3、指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得华北理工大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解华北理工大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检

4、索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：年月日签字日期：年月日摘要摘要目的饥饿条件下机体处于营养物质和能量摄入不足或缺乏的状态，自噬是一个基本的生物学过程，其基本功能之一是使细胞在饥饿和其他形式的胁迫期间能够消化其自身的胞质成分而维持细胞的存活。机体对饥饿状态代谢反应的整体调节是复杂变化的，且自噬本身也是一个随时间连续变化的动态过程。脑作为神经中枢，其由饥饿引起的应激反应具有特殊性。本研究拟经自噬体的角度，探讨饥饿时相对大鼠大脑皮质自噬的影响。方法健康雄性SPF级SD大鼠105只

5、，3月龄，体重330~370g，采用分层随机化法分为3组：正常对照组（C组，n＝15）、短期饥饿组（SS组，n＝45）和长期饥饿组（LS组，n＝45）；SS组随机分为饥饿1d（S1亚组）、2d（S2亚组）、3d（S3亚组）三个亚组（n＝15），LS组随机分为饥饿5d（S5亚组）、7d（S7亚组）、9d（S9亚组）三个亚组（n＝15）。饥饿期间大鼠无饲料供应，自由饮水。各组饥饿处理结束后，采用苏木素-伊红（HE）染色观察脑组织病理学改变，采用透射电子显微镜观察脑组织超微结构，采用免疫组织化学染色检测自噬相关基因LC3与Beclin1的表达，采用Weste

6、rnblot法测定大鼠大脑皮质LC3与Beclin1的表达水平。结果1HE染色观测结果：C组大鼠脑组织结构完整；与C组比较，SS组脑组织病理学改变不明显；LS组可见部分神经元形态发生改变，且随着饥饿时间的延长，病理改变加重。2透射电子显微镜观测结果：C组神经元超微结构完整；SS组可见部分线粒体轻度肿胀；LS组可见毛细血管内皮细胞肿胀，基膜破损，线粒体呈现不同程度的损伤，可见包裹细胞器的自噬体。3免疫组织化学染色结果：与C组比较，SS组的S1和S2亚组大鼠大脑皮质LC3与Beclin1表达差异无统计学意义（P＞0.05），S3亚组LC3与Beclin1表

7、达上调（P＜0.05），LS组LC3与Beclin1表达上调（P＜0.01）；与SS组比较，LS组大鼠大脑皮质LC3与Beclin1表达上调（P＜0.01）。各亚组间，S1和S2亚组比较大鼠大脑皮质LC3与Beclin1表达差异无统计学意义（P＞0.05）；与S1和S2亚组比较，S3亚组LC3与Beclin1表达上调（P＜0.05）；S3、S5、S7亚组LC3与Beclin1表达逐渐上调（P＜0.01）；与S7亚组比较，S9亚组LC3表达上调（P＜0.01），而Beclin1表达差异无统计学意义（P＞0.05）。4Westernblot检测结果：与C组

8、比较，SS组的S1和S2亚组大鼠大脑皮质LC3-Ⅱ与Beclin1表达差异无统计学意义（P＞-