基于转录组测序的荆州黑麦基因组特异标记开发与染色体定位分析

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1、分巧号？淵学号２０測１１７８？．為请泉達＊參全日制专业学位硕壬学位论文基于转录组测序的荆州黑麦基因组特异标记开发与染色体定位分析了桃春指导教师开增军教授学位类别农业推广硕±专业名称作物．－ｒ．＇研究方向小麦分子细胞遗传学—ＶＶ．答辩日期二〇五年八月—＼＿＇Ｊ．．＇式■＇－■■，？？《．．？Ｉ：＞■．．．．■＇Ａ：ＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＡＮＤＰＨＹ別ＣＡＬＬＯＣＡＬＩＺＡＴＩＯＮＯｆ－ＲＹＥＧＥＮＯＭ

2、ＥＳＰＥＣＩＦＩＣＭＡＲＫＥＲＳＢＡＳＥＤＯＮＴＲＡＮＳＣＲＩＰＴＯＭＥＳＥＱＵＥＮＣＥＳＯＦＳＥＣＡＬＥＣＥＲＥＡＬＳＢｙＤｉｎｇＴａｏｃｈｕｎＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄｂｙＰｒｏｆ．ＱｉＺｅｎｇｊｕｎＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＳｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙ化ＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉＵｍｅｎｔ化化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ化ｒＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇ

3、ｙＡｕｕｓｔ２０１５ｇ，原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中Ｗ明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名：节）（弁５日了；＾＾学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。，允许论文被査阅和借阅本人授权南京农业大学

4、可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文采用影印。保巧□，在年解密后适用本授权书；本学位论文属于不保密口。（请＂。在Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者（需亲笔）签名；１＞，ｓ年Ｗ曰巧）庵？导师（需亲笔）签名年月Ｔ日＾目录目录摘要ＩＡＢＳＴＲＡＣＴ阳一第部分文巧综巧１１分子标记在小麦染色体工程中的应用１１．１染色体工程的概念与意义１１．２分子标记的类型与发展１１．３基于ＮＧＳ测序的分子标记开发与应用２１．４分子标巧在小麦染色体工程中的应用４

5、１．４．１鉴定染色体部分同源性４１．４．２用于小麦异染色体系的选育与鉴定．４１．４．３外源抗病基因的追踪与辅助选择５１．４．４外源抗性基因的精细定位与克隆５第二部分研究报告７１材料与方法．．．．．．．—７１．１植物材料７１８．２来源于荆州黑麦的转录组序列相似性比较和引物设计１．３分子标记分析８１．３ＤＮＡ．１的提取８１ＣＲ９．３．２Ｐ扩増及扩増产物的检测２结果与分析９２．１百萨偃麦草ＥＳＴｓ标记在荆州黑麦中的可转移性分析９２－．２基于ＲＮＡＳ巧的荆州黑麦基因组特异标记开发与染

6、色体定位１０２．２．１引物设计１０１基于转录组测序的荆州黑麦基因组将异标记开发与染色体定位分析２．２．２引物的扩增分析和荆州黑麦基因组特异标记的筛选１１２．２．３多态性标记在荆州黑麦染色体上的定位１３２．３荆州黑麦特异标记的应用分析２０３２４－３．１基于ＲＮＡｓｅｑ开发荆州黑麦特异标记的特点２４３．２荆州黑麦特异标记的染色体定位２５３．３荆州黑麦特异标记的应用潜力２５全文结论２７参教献２９致巧３５摘要基于转录组测序的荆州黑麦基因组特异标记开发与染色体定位分析摘要工

7、、优品种的重要途径。分子染色体程是拓宽小麦遗传基础，培育高产质和抗病＂、入加快外源基因的转标记可有效追踪鉴定导到小麦背景中的外源染色体和片段，移利用和物理定位，为染色体工程的发展注入了新的活为。我国栽培黑麦品种荆州黑麦（庇ｃａ／ｅｃｅｒｅａ／ｅＬ．ＣＶ．Ｊｉｎｇｚｈｏｕｈｅｉｍａｉ，ＪＺＨＭ）高抗白粉病、黄花叶病和纹枯病，在其染色体化和化上均发现抗白粉病基因，但是，由于这些染色体在巧有有利基因的同时还携带不利基因，因此培育仅具目标基因的小片段