基于疏通肺络法研究艾灸对肺纤维化大鼠上皮细胞-间质细胞转分化机制的影响

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1、学位论文＂＂基于疏通肺络法研巧艾灸对肺纤维化大鼠上皮细胞－间质细胞转分化机制的影响＂＂ＢａｓｅｄｏｎｌａｗｏｆｄｒｅｄｇｅｌｕｎｇｃｏＵａｔ：ｅｒａｌｓｒｅｓｅａｒｃｈｍｏｘｉｂｕｓｔｉｏｎｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｏｎｅｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎｉｎＲａｔｓｐｗｉｔｈｕｌｍｏｎａｒｆｉｂｒｏｓｉｓｐｙ周艳指导教师姓名：苗维纳教授申请学位级别：硕±学化专业名称：中西睽结合暮础论文提交时间：２０１５年５月３０日论

2、支答辩时间：２０１５年５月３０日二〇—五年五月成都中医药大学２０１５届硕±研巧生学位论文中文摘要研究目的：肺纤维化ＰＦ一（ｕｌｍｏｎａｒｆｉｂｒｏｓｉｓ，）是呼吸系统最严重的疾病之临床上主要表ｐｙ，现为进行性呼吸困难、喘息、气短、咳嗽咯疾拟限制性通气功能障碍，低氧血症为－－主最终导致呼吸衰竭。上皮细胞间质细胞（ｅｉｔｈｅｌｉａｌｍｅｓｅｎｃｈｍａｌｔｒａｎｓｉｔｉｏｎＥＭＴ），ｐｙ，一理论是近年国际研究器官纤维化的主要成果之。因此本课题拟在前期研究成果选取（肺俞）ｏ

3、ｘ化ｕｓｔｉｏｎ）观察由的基础么上，采用疏通肺络治法、膏育俞艾灸（ｍ，博来霉素复制的经典肺纤维化大鼠模型在文灸治疗疗程中上皮细胞蛋白Ｅ－巧黏蛋白（Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ，Ｅ－ｃａｄ）间质细胞蛋白曰－平淆肌蛋白（ａ－ｓｍｏｏｔｈｍｕｓｃｌｅａｃｔｉｎ，ａ，－ＳＭＡ）、波形蛋白（ｖｉｍｅｎｔｉｎ）的ｍＲＮＡ表达的动态改变期步阐明疏通肺络法调控肺纤维化ＥＭＴ关键位点与调控规律。方法：８周龄健康ＳＰＦ级大鼠８１只体重１８０±２０雌雄各半。将大鼠随机分组：空，ｇ，白对照（Ｃ）组９只；模型（

4、Ｂ）組：模型７天（Ｂ７）组９只、模型１１天（Ｂｎ）组９只、模型２３天（Ｂ２３）组９只、模型３５天（Ｂｍ组９只；艾灸（Ｍ）组：艾灸）１１天（Ｍｉｌ）组９只、艾灸２３天（Ｍ２３）组９只、艾灸３５天（Ｍ３５）组９只；阳性一对照（泼巧松Ｐ）组９只。造模采用Ｔｈｒａｌｌ次性注入博来霉素复制，等方法气管内肺纤维化模型空白对照组同样按造模方法予气管内一次性注射等体积的生理盐，。各组造模均于第二天开始治疗及干预、膏育俞水，艾灸组交替艾灸双侧肺俞；泼尼松组Ｗ泼巧松灌胃；空白组和所有模型组与艾灸狙采取同样

5、的抓取固定，不给予任何治疗。模型组第７、１１、２３、３５天，分别选对应时间点姐大鼠；艾灸组第１１、２３３５一３５、天（每疗程后天），分别选取对应时间点大鼠；泼尼松组、空白组于天后全部选取。各組称取体重，采取股动脉放血处死大鼠，打开胸腔，观察肺大体颜色、体积、有无出血点、结节等。取左肺组于１０％中性甲酸固定，再选取左肺上叶固定、包埋、切片行册、Ｍａｓｓｏｎ染色后漱照Ｓｚａｐｉｅ法进行肺泡炎分级评分和肺纤维化分级评分。取右肺上叶组织用于进行实时巧光定量聚合酶链反应（ＱＰＣＲ）￣ｃａｄｈ

6、ｅｒｉｎａ－检测ＥｍＲＮＡ、ＳＭＡｍＲＮＡ、ｖｉｍｅｎｔｉｎｍＲＮＡ的表达。实验过程中所．０进行统计学分析得数据均采用ＳＰＳＳ１９，所有计量数据都用均数±标准差來表示，＞＜采用多因素方差分析进行统计学分析／０．０５表示差异具有统计学意义。，结果：Ｉ成都中医药大学２０巧届硕±研充生学位论文一１．各组大鼠般情觀察：空白对照组大鼠呼吸均匀平稳，毛发润泽光亮，反应灵敏，大便成形，体重正常增长；模型组大鼠呼吸急促，胸廓起伏增大加快，鼻部及爪甲呈青紫色，精神萎靡不振，弓背

7、礎缩，毛发稀疏无光泽，大便糖稀，体重明显下降；治疗后，艾灸姐与模型組相比一般情况有较大的改善。；阳性对照组同艾灸组无明显差异２．肺系巧＜０模型组、艾灸组和阳性对照组各组肺系数均显著大于空白对照组（ｆ．０１）；模＞＞型组ｌｉｄ与艾灸组ｌｉｄ无统计学差异００．０５），模型组巧ｄ肺系数较艾灸组２３ｄ、模型组３５ｄ肺系数较艾灸姐３５ｄ均升高，有显著性差异（ｆ＜０．０１）；模型组３５ｄ肺系数较阳性对照組高，有统汁学差异（户＜０．０５）；艾灸３５ｄ组与阳性对照组肺系数＾无统计学意义（／０．０５

8、）。３流理学观察３．１模型组：模型组第７、ｌｉｄ肺泡炎程度较空白对照组均显著升离（户＜０．０１），模型姐７ｄ肺巧维化程度与空白对照细无明显区别统计学无差异（Ｐ＞０．０５）模型组，，ｌｉｄ肺纤维化明显较空白对照组严重（ｆ＜０．０１）；模型组第２３、３５ｄ肺泡炎程度减轻但较空白对照组仍严重（户＜〇．〇５）模型组２３、３５ｄ肺纤维化程度较空白对照组，严重，有显著性差异（Ｐ＜０．０１