STAT3基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞外泌体的分离与鉴定

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1、分类号：R541.4学校代码：10392学科专业代码：100201学号：2151003253硕士研究生毕业论文STAT3基因修饰大鼠骨髓间充质干细胞外泌体的分离与鉴定SeparationandIdentificationofExosomesfromSTAT3Gene-modifiedmesenchymalstemcellsofrats学位类型：医学硕士所在学院：协和临床医学院申请人姓名：孙石峰学科、专业：内科学（心血管病）导师：蔡平副教授指导老师：范林副教授研究起止日期：2016年2月至2018年1月答辩委员会主席：林金秀教授答辩日期：2018年05月18日二○一八年五月福建医科

2、大学硕士学位论文福建医科大学硕士学位论文目录英文缩略词„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1中文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2英文摘要„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4前言„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„6材料和方法„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„91.材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„91.1实验动物„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„91.2主要材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„91.3主要仪器„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„102.方法„„„„

3、„„„„„„„„„„„„„„„„„„„112.1大鼠骨髓间充质干细胞的提取„„„„„„„„„„„112.2大鼠骨髓间充质干细胞的冻存和复苏„„„„„„„„122.3大鼠骨髓间充质干细胞鉴定„„„„„„„„„„„„122.4过表达STAT3慢病毒载体构建„„„„„„„„„„„122.5慢病毒的包装及滴度„„„„„„„„„„„„„„„132.5.1病毒包装细胞293T培养„„„„„„„„„„„„142.5.2病毒包装„„„„„„„„„„„„„„„„„„„142.5.3病毒滴度的测定„„„„„„„„„„„„„„„„152.6STAT3慢病毒质粒转染BMSCs„„„„„„„„„„„152

4、.7间充质干细胞外泌体的提取„„„„„„„„„„„152.8Western-blot检测BMSC-exosomes特异标志物和STAT3蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„162.8.1exosomes的提取„„„„„„„„„„„„„„„„162.8.2Westen-blot检测BMSC-exosomes特异标志物和STAT3蛋白„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„16福建医科大学硕士学位论文2.9.透射电子显微镜观察„„„„„„„„„„„„„„„„172.10统计学处理„„„„„„„„„„„„„„„„„„„17实验结果„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„

5、„„181大鼠骨髓间充质干细胞的培养及鉴定„„„„„„„„„182STAT3-modified慢病毒的构建„„„„„„„„„„„„193慢病毒的包装及滴度检测„„„„„„„„„„„„„„224慢病毒感染BMSCs„„„„„„„„„„„„„„„„„225大鼠骨髓间充质干细胞来源外泌体的提取与鉴定„„„„„246过表达STAT3和干扰Si-STAT3慢病毒载体转染BMSCs后STAT3蛋白的检测„„„„„„„„„„„„„„„„„„25讨论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„27结论„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„31参考文献„„„„„„„„„„

6、„„„„„„„„„„„„„„„32文献综述„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„福建医科大学硕士学位论文英文缩略词（Abbreviation）缩略词英文全称中文全称MSCmesenchymalstemcell间充质干细胞AMIacutemyocardialinfarction急性心肌梗死BMScbonemarrowmesenchymalstemcell骨髓间充质干细胞BMSc-exosomesbonemarrowmesenchymal骨髓间充质干细StellcellDerivedexosomes源外泌体STAT3signaltransducerandactivatorof信

7、号转导及转录激Transcription3活因子3SiRNAsmallinterferenceRNARNA小干扰片段FBSfetalbovineserum胎牛血清PBSphosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液PCRpolymerasechainreaction聚合酶链反应GFPGreenFluorescentprotein绿色荧光蛋白STAT3-BMScsignaltransducerandactivator信号转导及转录-exosomesOfTranscrip