三种内酯类化合物对乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用及机制研究

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1、分类号：单位代码：１０１４０密级：公开学号：４０３１５３１８７７ＬＩＡＯＮＩＮＧＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕士学位论文ＴＨＥＳＩＳＦＯＲＭＡＳＴＥＲＤＥＧＲＥＥ三种内酯类化合物对乳腺癌细胞论文题细－胞ＭＣＦ７的抑制作用及机制研究Ｉｎｖｅｓｔｉａｔｉｏｎｏｎｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎａｎｄｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｒｅｅｌａｃｔｏｎｅｇｏｕｎｄ英文题目：ｃｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｔｈｒｅａｅｌａｃｔｏｎｅｒｃｅｏｍｐｓ论文作者：刘美佳指导教师：曹向宇教授专业：食品科学—完成

2、时间一：二〇八年五月辽宁大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文是本人在导师的指导下独立完成的。论文中取得的研宄成果除加以标注的内容外，不包含其他个人或集体已经发表或撰写过的研宄成果，不包含本人为获得其他学位而使用过的成果。对本文的研宄做出重要贡献的个人和集体均已在文中进行了标注，并表示谢意。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。．学位论文作者签名：裏年ｔ月巧曰学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交

3、学位论文的原件、复印件和电子版，允许学位论文被查阅和借阅。本人授权辽宁大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。学校须按照授权对’学位论文进行管理，不得超越授权对学位论文进行任意处理。（）。保密，在年后解密适用本授权书（保密：请在括号”‘内划ｗ）授权人签名：指导教师签名：日期：年玄月４日日期：年ｔ月ｙ日申请辽宁大学硕士学位论文三种内酯类化合物对乳腺癌细胞MCF-7的抑制作用及机制研究Investigationonthei

4、nhibitionandmechanismofthreelactonecompoundsonbreastcancercellMCF-7作者：刘美佳指导教师：曹向宇教授专业：食品科学答辩日期：2018年5月17日二○一八年五月·中国辽宁摘要摘要土木香(InulaheleniumL.)是菊科旋覆花属植物，据报道土木香中含有40多种不同的成分，其中萜类化合物和菊糖是其最主要的成分。土木香内酯和异土木香内酯是从土木香中提取到的生物活性较强的倍半萜内酯类化合物。木香（Aucklandialappa）为菊科植物，其根有多种药理功能。木香烃内酯是从木

5、香根的中提取到的倍半萜内酯类化合物。对三种内酯类化合物的研究多集中于抗炎、抗氧化、抗菌以及抗肿瘤活性方面，其中抗肿瘤作用尤为突出。已有研究表明，土木香内酯、异土木香内酯和木香烃内酯这三种内酯类化合物对胃癌、肝癌、结肠癌等都具有抑制作用，但对乳腺癌的抑制活性和作用机制研究报道较少。因此本研究以乳腺癌细胞MCF-7作为研究对象，分别探讨土木香内酯、异土木香内酯和木香烃内酯三种内酯类化合物抑制乳腺癌细胞的增殖和转移及其可能的作用机制。本研究选用人乳腺癌细胞MCF-7作为研究对象；在显微镜下观察不同浓度的土木香内酯(10μM、20μM、30μM

6、和40μM)、异土木香内酯（100μM、200μM、300μM和400μM）和木香烃内酯（10μM、20μM、30μM和40μM）对细胞形态的影响；采用MTT法检测不同浓度的土木香内酯、异土木香内酯和木香烃内酯在不同的处理时间(24h、48h)下对乳腺癌MCF-7细胞活性的抑制情况；通过Hoechst33258实验和流式细胞技术实验检测不同浓度的土木香内酯(10μM、20μM和30μM)、异土木香内酯（100μM、200μM和300μM）和木香烃内酯（20μM、30μM和40μM）对乳腺癌MCF-7细胞凋亡的影响；采用划痕实验和集落形成

7、实验检测三种内酯类化合物对乳腺癌MCF-7细胞的迁移以及集落形成能力的影响；采用WesternBlot实验方法检测不同浓度的三种内酯类化合物处理细胞后凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Caspase3、Caspase12和转移相关蛋白MMP2、MMP7、MMP9的表达，同时还对p38MAPK、NF-κB和Nrf2信号通路中关键蛋白的表达进行检测。研究结果表明：镜下观察经过不同浓度的土木香内酯、异土木香内酯和木香烃内酯处理后的细胞形态由菱形变为圆形，且细胞数目明显随药物浓度和处理时间的增加而减少，说明三种内酯类化合物不仅可以改变细胞

8、形态，还可以I摘要抑制细胞的增殖；MTT实验结果表明，土木香内酯、异土木香内酯和木香烃内酯可以显著的抑制细胞的生存能力和生长活性，并存在时间和剂量依赖性；Hoechst33258实验和流式细胞技术实验结果表