calphostin c对乳腺癌细胞增殖的抑制作用及相关机制

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1、CalphostinC对乳腺癌细胞增殖的抑制作用及相关机制作者：千新来，崔静，任峰，赵杰，冶亚平，贺国洋，李新强，朱慧芳，韩芳毅，杨慧林，王霞，原志庆【摘要】　　目的研究CalphostinC对乳腺癌细胞MDAMB435S增殖的影响及初步机制。方法通过观察CalphostinC处理MDAMB435S细胞前后细胞的生长速度、倍增时间、克隆形成率和细胞周期分布等变化，探讨CalphostinC对MDAMB435S细胞增殖的影响；通过Westernblotting、免疫细胞化学染色和RTPCR等方法探讨CalphostinC影响MDAMB

2、435S细胞增殖的初步机制。结果与MDAMB435S亲本细胞(对照组)相比，CalphostinC处理的MDAMB435S细胞(实验组)生长速度明显减慢，倍增时间明显延长(P<0.01)，并且呈现浓度和时间依赖性；对照组和实验组细胞克隆形成率分别为(82.33±6.81)%和(22.00±1.73)%，差异有统计学意义(P<0.01)；实验组细胞周期出现明显的G1期阻滞(P<0.01)。Westernblotting和免疫细胞化学染色结果显示，与对照组细胞相比，实验组细胞中蛋白激酶Cα(proteinkinaseCα,PKC

3、α)表达没有明显变化，但活性状态(胞质转位至胞膜)的PKCα显著减少。Westernblotting和RTPCR结果显示，与对照组细胞相比，实验组细胞中p53、CyclinA和CyclinB表达没有明显变化，但p21表达上调，CyclinE表达下调。结论CalphostinC可显著抑制乳腺癌细胞MDA16MB435S的增殖，该作用可能与其抑制PKCα活性、上调p21表达和下调CyclinE表达有关。【关键词】钙磷酸蛋白C；蛋白激酶C；乳腺癌；增殖　　China)ABSTRACT:ObjectiveToexploretheeffectsofCal

4、phostinContheproliferationofbreastcarcinomacells(MDAMB435S)anditspreliminarymechanism.MethodsTheeffectsofCalphostinContheproliferationofMDAMB435Scellswerestudiedbyobservingchangesofthegrowthrate,doublingtime,cloneformingefficiency,anddistributionofcellcycleofMDAMB435Scel

5、lsbeforeandafterCalphostinCtreatment.Furthermore,themechanisminvolvedwasanalyzedbyWesternblotting,immunocytochemistryandRTPCRassay.ResultsComparedwiththoseoftheparentalMDAMB435Scells(controlgroup),thegrowthratewassuppressedmarkedlyandthedoublingtimewasprolongedsignificantly(

6、P<0.01)intheMDAMB435ScellstreatedwithCalphostinC(experimentalgroup),andthechangespresentedconcentrationandtimedependencepatterns.Furthermore,thecloneformingefficiencyincontrolgroupandexperimentalgroupwas(82.33±6.81)%and(22.00±1.73)%,respectively,withasignificantdifferen

7、ce(P<0.01).16Moreover,fortheexperimentalgroupcells,thecellcyclearrestedinG1phase(P<0.01).TheresultsfromWesternblottingandimmunocytochemicalstainingindicatedthatcomparedwiththatoftheparentalMDAMB435Scells,theexpressionofproteinkinaseCα(PKCα)didnotchangesignificantly,butP

8、KCαinactivestatus(transpositionfromcytoplasmtocytomemb