亮氨酸拉链转录因子样1（lztfl1）在胃癌中的表达及其作用机制的研究

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1、分类号：单位代码：密级学号：硕士学位论文同等学力）中文论文题目：亮氨酸拉链转录因子样在胃癌中的表迖及其作用机制的研究英文论文题目：申请人姓名：阮国栋指导教师：王敏专业名称：临床医学研究方向：肿瘤学所在学院：医学院申请人单位：浙江绍兴第二医院论文提交日期年月亮氨酸拉链转录因子样在胃癌中的表达及其作用机制的研究论文作者签名：指导教师签名：论文评阅人周东辉教授浙江大学医学院附属第一医院评阅人匿名评阅评阅人匿名评阅答辩委员会主席：郭勇教授浙江省中医院委员吴福生教授浙江大学医学院附属第一医院委员徐农教授浙江大学医学院附属第一医院委员严森祥教授浙江

2、大学医学院附属第一医院委员沈朋教授浙江大学医学院附属第一医院答辩日期：浙江大学研宄生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研宄成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得浙江大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解浙江大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，

3、允许论文被查阅和借阅。本人授杈浙江大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签名：签字日期：年厂月日签字日期：年月日浙江大学硕士学位论文致谢致谢岁月如歌，光阴似箭。一转眼大学毕业年了，大学毕业后工作和生活的艰辛使我迟巡没能实现考取研究生的梦想，我曾经痛苦和仿徨过。感谢医学院雪中送炭，使我有了攻读硕士研究生的机会。在职研究生生活即将结束。回首求学历程，和每一个挑灯苦读的夜晚，对那些引导我、帮助我、激励我的人

4、，我心中充满了感激首先要感谢导师王敏教授，从论文定题到写作定稿，倾注了她的大量的心血。在我攻读在职硕士研究生期间，深深受益于她的关心、爱护和谆谆教导《作为导师，她点拨迷津，让人如沐春风；作为学长，关怀备至，让人感念至深《在此谨向我的导师表示我最诚挚的敬意和感谢！还要感谢所有的授课的医学院的教授们。是您们启开了我第二次智慧之门。同时，我要感谢一直关心与支持我的家人和同事们！还有我们在职研究生班的全体研究生同学，我们朝夕相处，共同进步。感谢你们给予我的所有关心和帮助同窗之谊，我将终生难忘！需要特别感谢的是我的家人和父母。父母的养育之恩无以为

5、报，他们是我多年求学和工作、生活路上的坚强后盾，在我面临人生选择的迷茫之际，为我排忧解难，他们对我无私的爱与照顾是我不断前进的动力。浙江大学硕士学位论文中文摘要亮氨酸拉链转录因子样在胃癌中的表达及其作用机制的研究浙江大学医学院肿瘤学硕士研究生阮国栋导师王敏教授中文摘要目的：了解亮氨酸拉链转录因子样，在胃癌组织和细胞系中的表达水平和启动子甲基化情况，研究表达水平对胃癌增殖和迁移能力的影响，阐明在胃癌中表达调控机制。方法：通过免疫组织化学的方法检测例胃癌患者组织标本胃癌组织和正常胃粘膜组织中蛋白的表达水平；通过实时定量和分别检测种胃癌细胞株

6、（、、和以及正常胃粘膜上皮细胞株，的的表达水平及蛋白表达水平。通过质粒瞬时转染方法在胃癌细胞株中过表达通过、流式细胞术和等实验技术来分析基因表达增加后对胃癌细胞增殖能力和迁移能力的影响。应用特异性的，在正常胃粘膜上皮细胞株中敲低基因的表达，通过、流式细胞术和等实验技术来分析基因表达减少后对胃粘膜细胞增殖能力和迁移能力的影响。在胃癌细胞株中敲低转录因子以及在中过表达后，通过实时定量和的方法检测和蛋白表达浙江大学硕士学位论文中文摘要水平的变化。对基因的启动子区进行分析，通过染色质免疫共沉淀实验检测转录因子对启动子区的调控作用。通过亚硫酸氧盐

7、硫化测序（和亚硫酸氢盐甲基化特异性，的方法检测启动子区甲基化的情况。在胃癌细胞株中使用甲基化抑制剂检测使用后基因表达变化情况。结果：蛋白在胃癌组织中的表达水平明显低于正常胃粘膜。在胃癌细胞株中，基因的和蛋白水平均为低表达水平，而在正常胃粘膜上皮细胞株中则表现为高表达。增加基因表达能抑制胃癌细胞的增殖、促进凋亡，并且在一定程度上抑制胃癌细胞的迁移，反之降低基因表达能促进胃癌细胞的增殖和迁移。过表达能抑制基因在和蛋白水平的表达，敲低后，基因在和蛋白水平均有所上升。通过对基因的启动子区的直接结合作用，抑制基因的转录表达。胃癌细胞株中基因的启动

8、子区处于高甲基化状态，经过去甲基化处理后，基因表达发生上调。结论：基因在胃癌组织水平和胃癌细胞水平均表现为低表达，增加基因的表达能抑制胃癌细胞的增殖和迁移能力，敲低基因表达将增加细胞的增殖和迁移能力。浙江大