mmp-2及发热对体外血脑屏障紧密连接蛋白occludin的影响

《mmp-2及发热对体外血脑屏障紧密连接蛋白occludin的影响》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、学术学位硕±学位论文单位代码：１０６７８分类号：Ｒ７４３．３学号：２０１２３９５密妻及：尾略６种天常硕壬学位论文？ＭＭＰ－２及发热对体外血脑屏障紧密连接蛋白ｏｃｃｌｕｄｉｎ的影响院巧）、所昆明医科大学附属昆华医院硏究生姓名单丽学科、专业神经病学学位类型学术学位指导教师孟强教授二〇—五年五月見跨ｉｌ种常硕±学位论文ＭＭＰ－２及发热对体外血脑屏障紧密连接蛋白ｏｃｃｌｕ出ｎ的影响研究生姓名单丽学科、专业神经病学申请学位类型学术学位指导教师孟强

2、教授完成日期二〇—五年五月定巧６种Ａ掌研究生学位论文研究撰写声明本人郑重声明；本学位论文是我本人在导师指导下，独立进行学位课题研究所取得的研究成果。论文中除特别加Ｗ标注和致谢的地方外，不包含他人或其他机构已经发表或撰写过的研究成果。对本研究和论文做过贡献的同道我均在论文中作了明确的说明并表明谢意。该学位论文资料若有不实之处，本人愿承担一切相关责任。论文作者（签名）：Ｗ又年月日ｙ尾跨Ｓ种／Ｉ常研究生学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解昆明医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留

3、并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版允许论文被查阅和借阔。学校可公布论文的全部或部分肉容（确属保密内容己注明，并在解密后遵守此规定）；学校可采用影印、缩印或其他手段保存本学位论文。学位论文作者（签名）；爾指导教师（签名）；＇Ｗ文年ｙ月日ＷＪＴ年｝月Ｗ日＂本人及导师同意将学位论文提交至清华大学中国学术期刊（光盎版）电＂ＮＫＩ子杂志社进行电子和网络出版系列数据库，，并编入Ｃ传播本学位论文的全部或部分内容，同意按《中国优秀博硕±学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。学位论文作者（签名）：ｉ指导教师

4、（签名）；＾／而雌年又月Ｘ？日月Ｗ曰）Ｍ年＞目录中文摘要１英文摘要４引胃８缩略词表１０材料与方法１１统计学方法２４实验结果巧４６全文结论５３参考文献５４综述５９攻读硕±学位期间发表论文情况６８Ｓ［谢６９昆明医科大学硕±研究生学位论文ＭＭＰ－２及发热对体外血脑屏障紧密连接蛋白０Ｃ加ｄｉｎ的影响研究生单丽导师孟强教授中文痛要【目的】卒中是全球人口死亡和残疾的主要原因，其发病机制十分复杂。缺血性－ｉ卒中是最常见的卒中类型

5、，约占全部卒中的８７％。血脑屏障化ｌｏｏｄｂｒａｎＢＢＢ一ｂａｒｒｉｅｒ），，是位于血液与脑组织之间的个选择性通透的屏障体系严格控制血管两侧的物质转运持中枢神经系统（ｃｅｎｔｒａｌｎｅｒｖｏｕｓｓｓｔｅｍＣＮＳ），从而维ｙ，内环境的相对稳定。卒中后ＢＢＢ破坏直接影响ＣＮＳ功能，导致血管源性脑水肿、出血性转化和神经元调亡，加重神经功能缺损。基质金属蛋白酶（ｍａ化ｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅｓ，ＭＭＰｓ）的激活被认为是破坏ＢＢＢ结构和功能的重要分子机－２ｒｏｔｅ－－ｍａｔｒｉｘｍｅｔ；ａｌｌｏｉｎａｓｅＭＭＰ制

6、。脑缺血时，基质金属蛋白酶（ｐ２，。可能通过降解内皮细胞紧密连接蛋白和基底腊成分使血管壁完整性破坏。发热是卒中患者早期常见并发症，有研究发现发热可加重卒中患者预后，而具体机制还未阐明。－，ＭＭＰ２因此，研究发热加重卒中后脑损伤的机制Ｗ及发热是否上调表达而加剧ＢＢ一对Ｂ紧密连接蛋白的损伤，就具有定现实意义。为此，本谋题通过原代培养ＳＤ大鼠乳鼠脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞，建立简便、易行的能够模抵在体Ｂ郎的体外细胞模型－２祀Ｂ模型。予Ｗ外源性添加ＭＭＰ和发热处置干预，分析ｃｃｉＰ－２及发热在脑缺血后Ｂ抓破坏方紧密连接

7、蛋白ｏｌｕｄｎ的变化，从而探索ＭＭ面可能的作用机制，为临床缺血性卒中患者并发症的防治提供理论依据。【方法】ＷＳＤ大鼠乳鼠为实验材料，采用酶消化法原代分离、纯化、传代培养获得脑微血管内皮细胞和星形胶质细胞，倒置显微镜下观察细胞的形态。经过肥染色，免疫巧光鉴定细胞及其纯度，使用培养３代的两种细胞通过Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室进行共培养，构建体外ＢＢＢ接触模型。并通过渗漏试验和ＬＹ渗透性测定，‘‘鉴定模型屏障功能。将构建成功的模型随机分为３７Ｋ常温、３９Ｃ发热、３７Ｃ常温＋ＭＭＰ－２３９Ｃ发热＋ＭＭＰ－２ｅｓ、四组，进而采用免疫细胞化

8、学法和ｗｔｅｒｎｂｌｏｔ方１１昆明医科大学硕±研巧生学位论文法观察各姐模型中郎Ｂ紧密连接蛋白ｏｃｃｌｕ