异丙酚对大鼠脑缺血再灌注脑组织紧密连接蛋白mmp-2,mmp-9表达的影响

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1、关于本论文学术方面的意见：实验研究了异丙酚对缺血再灌注大鼠脑组织紧密连接蛋白MMP2、MMP9表达的影响，对探讨血脑屏障的作用和异丙酚的相关脑保护机制具有一定意义。但研究在方法选择、取材及文献引用等方面存在问题：（1）方法学上作者仅选择免疫组织化学进行两类分子表达观察，未有进行蛋白印迹？请补充！（2）免疫组化照片质量不佳，请更换；（3）作者在动物取材方面未有清除交待于何处取组织，而血脑屏障在不同区域存在差异。（4）作者在关键引文3提到近期相关研究，而文献3并非对应报道？（5）文字功底差、撰写凌乱，请第二作者审阅后仔细修改！以上意见修改之后，请在此方框里对修改情况和争议处一一

2、作出说明！其他格式、撰写方面的意见仔细阅读以下批注后一一修改！存在争议且不做修改的地方，保留批注并在批注中解释：异丙酚对大鼠脑缺血再灌注脑组织紧密连接蛋白MMP2、MMP9表达的影响王进全，崔剑，曹剑，王恩琴（400038重庆，第三军医大学西南医院麻醉科）[摘要]目的通过研究异丙酚预处理对大鼠脑缺血再灌注脑组织紧密连接蛋白MMP2、MMP9表达的影响探讨异丙酚对脑组织的保护作用。方法方法部分文字完全看不清楚实验动物的处理（实验措施）方法？80只雄性清洁级SD大鼠[？周龄，体质量（240±280）g]随机分为：①假手术（A）组，②正常（B）组，③～④异丙酚预处理C1（缺血6h

3、）、C2（缺血12h）组，⑤～⑥异丙酚治疗D1（缺血6h）、D2（缺血12h）组，⑦～⑧缺血再灌注E1（缺血6h）、E2（缺血12h）组（n=10）。应用免疫组织化法检测于何时处理？大鼠脑组织基质金属蛋白酶2（MMP-2）及基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达，其中MMP-2及MMP-9应用PrimerExpress2.0设计MMP-2及MMP-9的引物及探针序列后测定，逻辑太混乱！用图像分析仪测定光密度值，电镜下分析面密度何谓“面密度”？。结果摘要的结果部分要把做过统计学分析得出最重要结论的数据和统计学结果全部写入，请视篇幅酌情添加！异丙酚预处理组与异丙酚治疗组的MMP-

4、2和MMP-9的表达水平较低，与缺血再灌注组比较，显著降低；较正常组和假手术组相比，明显升高。结论异丙酚可通过抑制大鼠缺血再灌注脑组织紧密连接蛋白MMP2、MMP9表达来保护缺血的脑组织。[关键词]异丙酚；MMP-2；MMP-9；紧密连接蛋白紧密连接即结合小带，是由跨膜蛋白、胞质附着蛋白及细胞骨架蛋白所组成的[1]，而脑微血管紧密连接为血脑屏障的主要结构基础，其可有效的阻止某些细菌入侵脑组织，从而达到保护脑组织的作用[2]。开篇让人感觉突兀，建议以疾病现状或临床问题开篇。但是也正因为血脑屏障的保护作用，也降低了药物对脑组织损伤的治疗。目前临床研究显示，全麻药异丙酚可以降低缺

5、血性脑损伤后血脑屏障通透性，脑血管事件的发生率，但异丙酚对脑保护的作用机制方面的研究报道较少，近期，有研究报道[3]组织紧密连接蛋白MMP2、MMP9在脑缺血性损伤后后表达显著升高，参与血脑屏障的破坏，加剧缺血后的脑损伤。本实验拟初步探讨异丙酚对SD大鼠脑微血管内皮细胞紧密连接蛋白MMP2、MMP9表达的影响，探讨异丙酚对脑组织的保护机制。1材料与方法1.1实验动物分组及设备、试剂来源？周龄清洁级健康雄性SD大鼠80只，体质量（240±280）数据有误吧？g（中国医科大学动物实验中心提供，批号******），随机分为：①假手术组（A组），②正常组（B组），③～④异丙酚预处理

6、C1（缺血6h）、C2（缺血12h）组，⑤～⑥异丙酚治疗D1（缺血6h）、D2（缺血12h）组，⑦～⑧缺血再灌注E1（缺血6h）、E2（缺血12h）组（n=10）。酶联免疫吸附法的仪器由郑州安图绿科有限公司提供；药品异丙酚由阿斯利康公司提供；MMP-2、MMP-9检测试剂盒由晶美生物工程有限公司提供。Mias图像分析系统，由山海交通大学图像分析研究所提供。1.2实验方法未能介绍清楚实验方法及分组后分别处理方法？1.2.1缺血再灌注动物模型制作方法参照参考文献[4]对A组和C组其他B、D、E各组如何处理？大鼠进行大脑中动脉线栓后缺血再灌注造模，方法如下：由大鼠左侧颈内动脉插入

7、线栓，建立大脑中动脉缺血模型，维持线栓在体内60min，大脑中动脉缺血60min后取出线栓。1.2.2干预方法实验大鼠于再灌注后6、12h，分别采用3.5%水合氯醛、异丙酚进行麻醉，快速断头后取全脑，加入生理盐水中制成10%的脑组织匀浆备用，所有的脑组织匀浆采用ELISA法测定蛋白量MMP-2和MMP-9的含量。同组组大鼠经？麻醉后打开胸腔，经升主动脉段快速灌注生理盐水，直至右心房流出液清亮为止，采用4%的多聚甲醛150mL灌注固定，断头取脑，将大脑组织置于4%的甲醛溶液中固定，采用免疫组织化学法检测B组大鼠脑组织