大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障超微结构及紧密连接蛋白occludin变化的研究

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1、大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障超微结构及紧密连接蛋白Occludin变化的研究f}I风与神经疾病杂志2007年8月第24卷第4期文章编号:1003—2754(2007)040425—03大鼠局灶性脑缺血再灌注血脑屏障超微结构及紧密连接蛋白Occludin变化的研究孙伟,杨鲍鹏，盛利，苏志强?425?摘要:目的研究大鼠局灶性脑缺血再灌注模型血脑屏障(BBB)超微结构和Occludin的变化，探讨BBB的结构改变及Occludin的表达异常在再灌注损伤中的作用•方法雄性Wistar大鼠，随机分成假手术组，缺血2h

2、再灌注3h,12h,24h,72h组，应用透射电镜,RT—PCR,免疫组化和WesternBlot等方法观察再灌注后不同时相缺血区皮质BBB的超微结构,OccludinmRNA和白水平的变化•结果局灶性脑缺血再灌注后，缺血区皮质BBB的超微结构受损,OccludinmRNA和蛋白表达水平下调•上述变化开始于再灌注后3h,再灌注24h达到高峰,72h开始减弱•结论脑缺血再灌注过程中,BBB的超微结构损伤及Occludin的表达下降加重了缺血再灌注损伤.关键词:脑缺血;再灌注损伤;血脑屏障(BBB);Occlud

3、in中图分类号:R743文献标识码:AAstudyontheultrastructureofbloodbrainbarrierandtheexpressionofoccludininfocalbrainischemia—reperfu—sioninjuryratsSUNWei,YAN(;Kun一peng.SttENGLi,etal.(DepartmentofNeurology,T^leFirstClinicalttospital()jHarbinMedicalUniversity,Harbin150001Ch

4、inaAbstract:ObjectiveTostudytheultrastructureofbloodbrainbarrier(BBB)andtheexpressionofOC・cludininratswithfocalbrainischemiareperfusionandclarifytheeffectofchangesofBBBandOccludininreperfu一slonmJury.MethodsMaleWistarratSwererandomlydividedintoshamoperatedgr

5、oupandischemia一reperfusiongroups.Themodeloffocalbrainischemia一reperfusioninjurywasinducedbymiddlecerebralarteryocclusion(MCAO).After2hoursoftemporaryMCAO,ratswererespectivelysubjectedreperfusionof3hours,12hours,24hoursand72hours.TheultrastructureofBBBwasobs

6、ervedwithelectronmicroscope.Reversetransciptionpoly—mersechainreaction(RT——PCR),immunohistochemistryandWesternblotwereusedtOdetectthelevelsofmRNAandproteinexpressionofOccludin.ResultsComparedwithsham一operatedgroup,ischemia一reperfusionsignifi一eantlydamagedth

7、estructureofBBBanddecreasedtheexpressionofOccludinintheischemiccortexwhichbeganat3hoursafterreperfusion,peakedat24hoursandsubsidedat72hours.ConclusionsThisstudyindicatesthatboththedamageofBBBandthedecreaseofOccludinaggravateischemiareperfusioninjury.Keyword

8、s:Brainisehemia;Reperfusioninjury;Bloodbrainbarrier(BBB);Occludin血脑屏障(BBB)是维持中枢神经系统内环境稳定的重要结构，主要由毛细血管内皮细胞，基膜和星形胶质细胞足板组成•其中，内皮细胞问的紧密连接(TJ)是BBB结构与功能的主要基础•近年来研究表明,BBB结构和功能的改变是许多脑部疾病病理牛理变化的核心过程』，但BBB在缺血再灌注