mir-146a对去势抵抗性前列腺癌自噬的调控及其调控通路的初步探讨

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1、表兩：硕±学位论文－ｍｉＲ１４６ａ对去势巧抗性前列朦癌自隨的调控及其巧控通路的初步探讨专业名祿；临床医学研究生巧名；凌志新导师姓名；路明本论文获国家自然科学基金８１０７０５９２、８１２０２０３４）教育部（２０１２００９２１２００７１）江苏省科技厅（２３３６局（２０１２０１０５３）东南大学（３２９０００２４０２）资助（ＢＫ２０１）南京市科技乂ｒｅ－ｌｉｍｉｎａｒｓｔｕｄｏｆｍｉＲ１４６ａｉｎｔｈｅｐｙｙｒｅｈａ－ｕｌａｔｉｏｎ！ｏｆａｕｔｏｉｎｃａｓｔｒ

2、ａ村ｏｎｇｐｇｙｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｒｏｓｔａｔ：ｅｃａｎｃｅｒＡＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎ（Ｔｈｅｓｉｓ）Ｓｕｂｍｉｔｅｄ化ＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＦｏｒ也ｅＡｃａｄｅｍｉｃＤｅｇｒｅｅｏｆＭａｓ化ｒｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＢｙＬＩＮＧＺｈｉｘｉｎＳｕｐｅｒｖｉｓｅｄＢｙＰｒｏｆ．ＣＨＥＮＭｉｎｇＳｃｈｏｏｌｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＳｏｕｔｈｅａｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙＭａ２０１５ｙ东南大学学位论文独创性声明本人声明所呈

3、交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，，，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果一也不包含为获得东南大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：ＪＸ曰期：如姑娜东南大学学位论文使巧授权声明东南大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档、，可Ｗ采用影印缩印或其他复制手段保存论文。本人电

4、子文档的内容和纸质论文的内容相一登）论文的全部或部致。除在保密期内的保密论文外，允许论文被查阅和借阅，可Ｗ公布（包括刊分内容。论文的公布（包括刊登）授权东南大学研究生院办理。日期：心ｆ研究生签名；导师签名：卑伽日中文摘要中文摘要ｍ－ｉＲ１４６ａ对去势抵抗性前列腺癌自懂的调控及其调控通路的巧步探讨东南大学医学院外科学硕±研究生凌志新导师陈明目的本实验通过观察去势抵抗性前列腺癌患者标本中癌组织内自睡相关蛋白的表达，并在体外实验中研究－ｔｎｉＲ１４６ａ对去势抵抗性前列腺癌的

5、自隨水平的影响，并初步探讨ｍ－ｉＲ１４６ａ对去势抵抗性前列腺癌调控自旌的分子机制。ｍＲ－ｍＮＡ１４ｎｅｒ方法１、应用脂质体Ｌｉｏｆａｃｔｍｉｎ２０００转染ｉ６ａｉＲ性对照（ａｔｉｖｅｃｏｎｔｏｌｐ和阴ｇ，ＮＣ－）至去势抵抗性前列腺癌细胞系（ＤＵＰＣ３细胞系），分别收集处理后化、１４５和１２ｈ、２４ｈ、４８ｈ、７化的前列腺癌细胞，制成电镜标本观察实验组和对照组细胞的自隨超微结构，并进行对比。２、将发生自唆时间段的前列腺癌细胞系培养并提取蛋白，运用ｅｓｅｒｎｎ－（－）Ｗｔｂｌｏ

6、ｔｉｇ检测微管相关蛋白１轻链３（ＬＣ３）的胞浆型（ＬＣ３Ｉ）和膜型ＬＣ３ＩＩ的表达量改变３、临床收集去势抵抗性前列腺癌（ｃａｓｔｒａｔｉｏｎｒｅｓｉｓｔａｎｔｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒＣＲＰＣ）患者经尿道前列腺电切病理标本共６例，按照Ｇｌｅａｓｏｎ评分等于７分的１，例和等于８分的３例及大于８分的２例，用免疫组化的方法观察６例标本癌组织和癌－旁组织自隆相关蛋白表达的改变４、应用脂质体Ｌｉｏｆａｃｔｍｉｎ２０００转染分别ｍｉＲ１４６ａ和ｐ对照的ｍｉＲＮＡ到相应前列腺癌细胞系，应用免疫巧光检测自隨相关

7、蛋白ＬＣ３的表达。－細、１化、－结呆ｉＲ１４６ａ后２ｈ、２４８ｈ、７２ｈ的ＤＵ１４５和ＰＣ３细胞系制成电１、将转染ｍ－－１４５－１４６ａ镜标本发现ＤＵ转染ｍｉＲ２４小时后实验组自旌体明显増加，提示ｍｉＲ１４６ａ对－－显差别ＤＵ１４５细胞系有促进自晚的作用，ＰＣ３细胞系各个时间段都无明。２、转染２４－－小时后ＤＵ１４５细胞系的ＬＣ３Ｈ／Ｉ的比值是对照组两倍，提示自隨水平増强。３、将６例去势抵抗性前列腺癌患者的标本进行免疫组化检测发现癌组织的自嗤水平较癌旁组织ｍ－４６ａ４、低，提示去势抵抗性前列腺

8、癌ｉＲ１的低水平导致自峰水平低。在巧光显微镜下Ｉ东南大学硕±学位论文检测转染ｍ－ａ－）ｉＲ１４６的前列腺癌细胞系（ＤＵ１４５观察到ＬＣ３表达増加。－－结论：ｌ、ｍｉＲ１４６ａ对去势抵抗性前列腺癌细胞系ＤＵ１４５有促进自隨的作用，自睹发生的高峰时期在２４小时左右。２、组织标本中去势抵抗性前列腺癌细胞因低表达