cited2水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响

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1、分类号：单位代码：密级：学号：学位论文水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响研究生：方园指导教师：曾申明教授申请学位门类级别：农学博士专业名称：动物遗传育种与繁殖研究方向：动物繁殖与配子胚胎生物技术所在学院：动物科技学院二零一五年五月分类号：单位代码：密级学号：博士学位论文水平对小鼠和人卵子质量和胚胎发育的影响研究生：指导教师：曾申明教授申请学位门类级别：农学博士专业名称：动物遗传育种与繁殖研究方向：动物繁殖与配子胚胎生物技术所在学院：动物科技学院二零一五年五月本研究受国家自然科学基金（项目批准号：和首都临床特

2、色应用与研究推广基金（项目批准号：的资助独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中已经注明引用和致谢的内容外，论文中不包含本人和其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：时间：年月日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定。本人同意中国农业大学有权保存及向国

3、家有关部门和机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人同意中国农业大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》或《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。保密的学位论文在解密后应遵守此协议）学位论文作者签名：时间：年月日摘要是调节着床后胚胎胎儿正常发育的转录辅助因子之一。目前，关于在卵母细胞成熟及早期胚胎发育过程中的作用未见报道，本研究旨在探索在卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中的作用。蛋白表达分析结果表明：蛋白主要表达于生长卵泡中。随后，通过对、、和

4、阶段的卵母细胞进行基因表达分析研究其在卵母细胞成熟过程中的表达情况。结果表明：水平在卵母细胞成熟过程中基本保持不变；蛋白在小鼠期卵母细胞中表达量较高并且主要定位于生发泡中，而在小鼠期卵母细胞中表达最低并弥散于胞质中。相对于发育濟力高的型染色质凝聚于核仁周围成环状期卵母细胞，蛋内在发育潜力低的染色质松散型期卵母细胞中表达更高。此外，蛋白水平在发育潜力低（形态异常）的小鼠期卵母细胞中显著高于发育潜力高（形态正常）的期卵母细胞，在体外老化的小鼠卵母细胞显著高于未老化的卵母细胞。随后，通过注射减少期卵母细胞中蛋白水平，

5、加速了卵母细胞核成熟而注射升高卵母细胞中蛋白水平，则抑制了卵母细胞的发生和极体排出。同时，基因在（、、和细胞）卵裂期胚胎、桑葚胚、囊胚和孵化囊胚各发育阶段胚胎中的表达量也逐渐降低。通过注射升高小鼠原核期胚胎的水平将会阻滞胚胎后期发育主耍表现为细胞期胚胎发育阻滞。检测发现水平在基闪超表达的小鼠胚胎中显著高于对照组胚胎。以上小鼠研究结果表明：水平和小鼠卵母细胞发育质量相关。随后，本实验探讨的水平过高是否也会影响人和家畜的卵母细胞质量。卵母细胞老化是影响家畜卵母细胞质量和发育潜力的重要原因之一。通过检测，本研究发现水

6、平在体外老化的猪卵母细胞中显著升高。随后，通过和防线菌酮（处理分别升高和降低猪卵母细胞胞内活性氧物质（水平，发现水平升高是猪卵细胞老化和碎裂的原因之一。随后，分析表明水平升高促进老化猪卵母细胞中必和的表达。现有研究表明：卵丘细胞中相关基因的表达水平能够在一定程度上反映胚胎的发育潜力，因此本实验就卵丘细胞中水平和人胚胎发育潜力的关系进行研究。蛋白表达分析结果表明：病人卵丘细胞中的蛋内水平各不相同。本研究将卵丘细胞中水平在整体均值以上的病人归入高表达组，均值以下则归入低表达组。随后，按分组统计病人的临床数据和胚胎数

7、据。在高表达组病人中，这些病人在周期中获取的卵母细胞表现出较低的受精率、优质胚胎率、着床率和妊娠率。此外，高表达组病人血清中基础卵泡刺激激素水平明显十降其卵丘细胞表现出较高的活性表达水平。定量分析表明，高表达组病人卵丘细胞中葡萄糖代谢相关基闪和孕酮受体（基因的表达及胞内葡萄糖水平也明显升高。对于病人，卵丘细胞中蛋白水平升高也会导致胚胎发育潜力下降。综上，我们得到以下结论：水平过高会抑制小鼠卵母细胞核成熟和早期胚胎发育。水平升高与卵母细胞发育潜力下降相关。人卵丘细胞中水平过高与受精后胚胎发育潜力下降相关。本研究首

8、次发现了基冈在小鼠卵母细胞成熟和早期胚胎发育过程中的表达规律和作用，以及水平升高勾卵母细胞和胚胎发育潜力下降的关系。丰富了哺乳动物的卵母细胞成熟和早期胚胎发育理论，为人胚胎发育潜力预测提供新的理论依据。关键字：卵母细胞，胚胎，卵丘细胞，小鼠，人ABSTRACTCited2，〇cellsshowedlowerCited2expressionlevelsdisplayedhigherfer