激素处理对小鼠植入前胚胎发育及胚胎冷冻解冻效果的影响

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1、分类号钮!生UDC硕士学位论文激素处理对小鼠植入前胚胎发育及胚胎冷冻解冻效果的影响归婧学科专业动物遣佳直叠曼鏊殖指导教师庄杰逸庄晟壁——论文答辩日期—煎堕逝．盟答辩委员会主席互徨逦学位授予日期㈣㈣㈣㈣删Y2408050广西大学学位论文原创性和使用授权声明本人声明所呈交的论文，是本人在导师的指导下独立进行研究所取得的研究成果。除己特别加以标注和致谢的地方外，论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写的研究成果，也不包含本人或他人为获得广西大学或其它单位的学位而使用过的材料。与我一同工作的同事对本论文的研究工作所做的贡献均已在论文中作了明确说明。本人在

2、导师指导下所完成的学位论文及相关的职务作品，知识产权归属广西大学。本人授权广西大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权保存并向国家有关部门或机构送交学位论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或其它复制手段保存、汇编学位论文。本学位论文属于：口保密，在年解密后适用授权。q不保密。(请在以上相应方框内打“√”)论文作者签名：·闰蠛艚撕签噬堡作者联系电话：15078828573日期：20f弓．6．f7_麓：仍易1电子邮箱：西ic0008@163．com激素处理对小鼠植入

3、前胚胎发育及胚胎冷冻解冻效果的影响摘要小鼠是胚胎工程研究中常用的动物之一，同时，小鼠还是基因功能和人类疾病研究常用的模型动物。为了进一步拓展研究领域，同时为家畜育种提供一个可资参考的技术体系，建立高效的小鼠胚胎操作平台是本实验室近期的主要目标之一。本试验通过对小鼠腹腔注射不同剂量超排激素(5IUPMSG+5IUHCG和10IUPMSG+10IUHCG)，观察了对小鼠植入前胚胎发育、胚胎冷冻解冻效果及卵巢组织和血清中蛋白成分变化的影响，这些数据的积累能为本实验室建立高效的小鼠胚胎操作平台奠定基础。实验首先筛选了最适合昆白小鼠胚胎发育的培养液。小鼠胚胎

4、分别培养在KSOM、M16、CZB三种培养液中，4天之后观察囊胚率，各组之间差异显著(分别为75．94％、46．07％、63。93％，P<0．05)，KSOM发育率明显高于其他两组。因此随后的实验均采用KSOM作为培养液。其次在含有不同浓度的牛磺酸(0mM、2．5mM、5mM、10mM、50mM)的KSOM中培养小鼠胚胎，4天后观察囊胚率，各处理组差异并不显著(分别为75．76％、77．45％、73、56％、73．06％、71．78％，P>0．05)，因此以后的KSOM中不添加牛磺酸。最后使用不同浓度激素(5IUPMSG+5IUHCG和10IUPM

5、SG+10IUHCG)对小鼠进行超排，观察囊胚发育情况(囊胚率分别为76．45％、67．08％，P<0．05)，各处理组差异显著。在使用不同剂量激素(5IUPMSG+5IUHCG和10IUPMSG+10IUHCG)对小鼠进行超排后，运用时间飞行质谱分别检测不同处理样品的蛋白含量T差异。对照组存在特异表达蛋白gil9116236，5IUPMSG+5IUHCG处理组存在特异表达蛋白gil9116236和gil48669394，IOIUPMSG+10IUHCG处理组中没有检测出特异蛋白。gil9116236和gil48669394两种蛋白的结构和功能尚不

6、清楚；经不同激素处理后在卵巢样品检测中并未发现特异蛋白。在使用不同剂量激素(5IUPMSG+5IUHCG和10IUPMSG+IOIUHCG)对小鼠进行超排后，将获得胚胎进行冷冻解冻，10IU激素组合胚胎复苏率和囊胚率高于5IU且差异显著(86．03％、73．63％VS82．93％、67．95％，P

7、卵，会导致血清中特异蛋白表达出现差异，5IUPMSG+5IUHCG超排激素组合促进小鼠血清中gi148669394蛋白的释放，10IUPMSG+10IUHCG超排激素组合抑Nd,鼠血清中gil9116236和gil48669394两种蛋白的释放。关键词：超排激素植入前胚胎时间飞行质谱血清卵巢EffectofDifferentDoesofHormonesonDevelopmentofMouseImplantationEmbryoandFrozen-ThawedEmbryoABSTRACTMouseistheoneoftheimportantmodel

8、animalfortheresearchorapplicationfieldsinembryoresearch，genet