马动脉炎病毒核酸与蛋白定量检测方法的建立

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4、炎（Ｅｕｉｎｅｖｉｒａｌａｒｔｅｒｉｔｉｓ，ＥＶＡ）是由马动脉炎病毒（Ｅｕｉｎｅａｒｔｅｒｉｔｉｓｑｑ一ｖｉｒｕｓＥＡＶ。为了建立能够快速、定量检测巨ＡＶ的，）引起的种马属动物的传染病病原学方法，本研巧应用两株抗ＥＡＶＮ蛋白的单克隆抗体（２Ｂ３和２Ｂ９）建立了在（ＡＣ－ＥＬ蛋白水平定量检测ＥＡＶ的抗原捕捉ＥＬＩＳＡＩＳＡ）方法。结果表明，该方法对ＥＡＶ的最低检出限为３．８６ＴＣＩＤｓｏ，特屏性良好，与马属动物常见病毒不发生交。叉反应，３次重复试验测定表明该方法稳定性离同时本研究

5、通过对ＥＡＶ（Ｂｕｃｙｒｕｓ一株）基因组ＯＲＦ７设计对特异性引物，应用新型染料ＥｖａＧｒｅｅｎ建立了能够在核２７？Ｔ－酸水平定量检测ＥＡＶ的民ＰＣ民方法，结果表明，当病毒载量在１０１０拷贝心Ｌｔ时，应用该方法测得的Ｃ值与ＥＡＶ病毒含量具有良好的线性关系，该方法能够检Ｕ＝测出的最低ＥＡＶ滴度为ｌ〇ＴＣＩＤＷｍＬ，对标准质粒的检出限为１０拷贝／＾ｉＬ，经６４次组内和组间重复试验测定，１〇、１〇、１妒拷贝／ｉＬ的标准质粒测得的Ｃｔ值的变异｜。系数全部小于２％，表明该方法重复性良好本研

6、巧建立的这两种检测方法为实驗室开展ＥＡＶ病原学研究奠定了良好的实验基础。ＡＣ－－关键词：马动脉炎病毒ＥＬ松Ａ；巧光定量ＲＴＰＣＲ；病毒含量；检测；ＤｅｖｅｌｏｍｅｎｔｏｆｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅＭｅｔｈｏｄｓｆｏｒＤｅｔｅｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＮｕｃｌｅｉｃｐＱＡｃｉｄａｎｄＰｒｏｔｅｉｎｏｆＥｕｉｎｅＡｒｔｅｒｉｔｉｓＶｉｒｕｓｑＡｂｓｔｒａｃｔＥｑｕｉｎｅｖｉｒａｌａｒｔｅｒｉｔｉｓ（ＥＶＡ）ｗａｓａｄｉｓｅａｓｅｔｈａｔｃａｕｓｅｄｂｙ

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