结直肠肿瘤中kras和braf基因突变特点及检测方法对比分析的研究

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1、硕士学位论文(2015届)结直肠肿瘤中KRAS和BRAF基因突变特点及检测方法对比分析的研究研究生姓名郑晴晴导师姓名常英专业名称内科学(消化病系)研究方向早期消化道肿瘤的诊治申请学位级别硕士研究生培养单位上海交通大学附属第六人民医院论文提交日期2015年4月MASTER’STHESIS(2015)StudyonMutationTraitsofKRASandBRAFGeneinColorectalTumorandComparativeAnalysisofTestMethodsGraduateStudent’sNameZHENGQingqingMentor’sNameCHANGY

2、ingProfessionalDirectionInternalMedicine(DepartmentofDigestiveDiseases)ResearchDirectionEndoscopicDiagnosisandTreatmentofEarlyGastrointestinalTumorsDegreeLevelMaster’sDegreeTrainingUnitShanghaiJiaoTongUniversityAffiliatedSixthPeople’sHospitalPaperSubmissionDateInApril2015上海交通大学学位论文原创性声明

3、本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中W明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名:曰親年巧曰办>上海交通大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借全部或部分内容编入有关数据库阅。本人授权上海交通大学可W将

4、本学位论文的论文。进行检索,可W采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位□年解密后适用本授权书。,在保密__本学位论文属于/不保密0^""V)(请在y?上方框内打学位论文作者签名;指导教师签名期;年1月户日日期:如年^月日日>王S>结直肠肿瘤中KRAS和BRAF基因突变特点及检测方法对比分析的研究中文摘要结直肠肿瘤中KRAS和BRAF基因突变特点及检测方法对比分析的研究中文摘要目的:研究远端结直肠腺瘤和腺癌病变中KRAS和BRAF基因突变的特点,初步了解分子学诊断在指导结直肠癌用药中的临床价值;同时,对比分析CastPCR法和DNA直接

5、测序法检测肠镜活检标本KRASG12D和BRAFV600E突变的差异。方法:在肠镜下,采用活检钳收集远端结直肠腺瘤(腺瘤组,n=32)和腺癌(腺癌组,n=20)病变组织;抽提病变组织基因组DNA;并采用DNA直接测序法测定病变组织DNA的KRAS和BRAF基因序列。同时,使用CastPCR法检测KRASG12D和BRAFV600E突变情况。结果:1、采用DNA直接测序法在32例腺瘤组患者中,KRAS基因突变7例,突变率21.9%;20例腺癌组患者中,KRAS基因突变7例,突变率35%。两组患者KRAS基因第12密码子和第13密码子较常见突变类型均为G12D和G13D。统计学结

6、果显示腺瘤组和腺癌组KRAS基因阳性突变率无明显统计学意义(P>0.05),而且两组患者KRAS基因阳性突变率与性别、腺瘤分化程度、腺癌分化类型之间均无明显统计学差异。两组患者均未见BRAFV600E突变。2、结直肠腺瘤组CastPCR法检测KRASG12D突变率28.1%,比DNA直接测序法高12.5%;结直肠癌组CastPCR法检测KRASG12D突变率30%,比DNA直接测序法高15%。两种方法阴性符合率100%。MutationDetector分析结果显示CastPCR法能够检测出突变量<1%的突变。从检测突变率分析,两种方法无统计学意义(P>0.05),结直肠腺瘤组

7、总体符合率87.5%(Kappa值0.6429),结直肠癌组总体符合率85%(Kappa值0.5833)。两组患者均未见BRAFV600E突变。结论:1、远端结直肠腺瘤和腺癌中BRAFV600E突变率较西方国家低;KRAS基因突变率较BRAFV600E基因突变率高,与西方国家基本一致,提示检测I结直肠肿瘤中KRAS和BRAF基因突变特点及检测方法对比分析的研究中文摘要KRAS基因突变在指导结直肠癌用药中的临床价值可能更大,可在野生型KRAS基因型结直肠癌抗EGFR单克隆抗体耐药的基础上进一步检测BRAF

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