探析高效液相色谱法测定大豆异黄酮的方法研究

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1、东北大学硕士学位论文高效液相色谱法测定大豆异黄酮的方法研究姓名：谷岩申请学位级别：硕士专业：化学工程指导教师：王林山;刘渭萍20090601东北大学硕士论文摘要高效液相色谱法测定大豆异黄酮的方法研究摘要异黄酮是黄酮类化合物中的一种，主要存在于豆科植物中，大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。由于是从植物中提取，与雌激素有相似结构，因此称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性，是天然的癌症化学预防剂。益生大豆异黄酮是从非转基因大豆精制而成的生物活性物质，是一种具有多种重要生理活性的天然营养

2、因子，是纯天然的植物雌激素，容易被人体吸收，能迅速补充营养。本研究建立了高效液相色谱法(HPLC)同时测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷、黄豆黄素的测定方法。实验考察了不同流动相体系、流动相配比、柱温、流速、进样量等因素对分离的影响，确定了最佳色谱条件：ZORBAXSB．C18色谱柱(150mnl×4．6mill，5lam)；二极管阵列检测器，检测波长为255nail色谱柱温度20"C，流速：1．0mL／min，进样体积：5“L。在最佳色谱条件下，建立了各物质的标准曲线，相关系数r为0．9996～0．9999：样品的加标回收率

3、均在83．O～100．6％，方法相对标准偏差在3．0％以内，实现了30min内对5种化合物的同时测定。研究结果表明，本实验所建立的测定大豆异黄酮五种组分大豆苷、黄豆黄苷、染料木苷、大豆苷元、黄豆黄素的高效液相色谱法，具有操作简单，快速、准确、重现性好、检出限低的特点。关键词：HPLC；异黄酮；大豆苷；黄豆黄苷；染料木苷；大豆苷元；黄豆黄素一I卜东北大学硕士论文AbstractStudyontheMeasurementofSoybeanIsoflavonesbyHighPerformanceLiquidChromatographyAbstractTh

4、eisoflavonesisonekindofflavonoidswhichmainlyexistsintheleguminousplant．砀esoybcanisoflavonesisakindofsecondarymetaboliteformedbythesoybeangrowth．Becauseitisextractedfromtheplant，hasthesimilarstructurewiththeestrogen，thereforeiscalledastheplantestrogens．nlesoybearisoflavonesestr

5、ogenaffectsthehormonesecretion，metabolismbiologyactivity，theproteinsynthesis，growthfactoractivity,isthenaturalcancerchemistrypreventive．HealthbenefitsofsoybeaRisoflavonesrefinedfromnon—geneticallymodifiedsoybearlisthebiologicalactivitysubstance，withavarietyofimportantphysiolog

6、icalactivityofnaturalnutritionfactorsandthepurenaturalplantestrogens．Itiseasilyabsorbedintothebody,capableofcomplementingnutritionrapidly．AmethodtodetermineDaidzinDin，GlycitinGlin，GenistinGin，DaidzeinDeniandGlyciteinGleinsimultaneouslybyhighperformanceliquidchromatography(HPLC

7、)wasdeveloped．Theeffectsofmobilephasecomposition，proportion，columntemperature，flowrateandinjectionvolumnonseparationhavebeenstudied．ThebestchromatographicconditionsincludedaZORBAXSB-Clscolumn(150mill×4．6nlln，5run)andaDADdetector．Theoptimaldetectionwavelengthswere255nm．Thecolum

8、ntemperatureWas20。C．TheflowrateWas1．0mL／min．111einjectionvolu