高效液相色谱法测定大豆秸杆中大豆异黄酮的含量-论文.pdf

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1、22．营养与8粮LlvEsTOcKANOPoUHRy

2、NDusTRyNo，302进牧草品种时．应选择相应的抗病品种。目前，国外培育的抗病苜蓿品种有高效液相色谱法皇后2000、全明星、盛世、牧歌702等。4．2利用牧草混播测定大豆秸杆中大豆异黄酮的含量混播可提高土壤肥力．增加牧草产量。研究表明，苜蓿与无芒雀麦混周志强播，可显著降低苜蓿褐斑病与黑茎病(浙江省兽药饲料监察所，浙江杭卅『310020)的发生．苜蓿与多年生黑麦草和三叶中图分类号：$816．17文献标志码：B文章编号：1008—0414(2014)06—0022-03草混播，可抵抗病害，增加产

3、量。摘要通过对大豆黄酮液相色谱检测条件和大豆秸杆中大豆异黄酮的提4．3合理施肥取、净化、浓缩方法的优化，建立一套适应浙江省衢州市实际情况的大豆秸杆中大豆合理施肥可增强植物的抗病性．异黄酮含量检测方法，并检测了衢州市野生及常规品种的大豆秸杆中大豆异黄酮的补偿因病害造成的损失，提高土壤中含量。结果表明：利用反相液相色谱法对乙酸乙酯提取的大豆秸杆中大豆异黄酮进行有益微生物。研究表明，增施钾肥，可直接检测，提取效率高，无杂质干扰，检测成本低廉适合于推广普及。衢州市野生及常降低苜蓿根病和镰刀病的发生。规品种的大豆秸杆中大豆黄酮和染料木素的含量相差不大，为83

4、7．7～955．3g。4．4提前刈割关键词大豆秸杆大豆异黄酮含量如出现褐斑病、白粉病等病害时，应提前刈割或放牧．以减少田间浸染大豆中含有一种结构与雌激素相1．1主要试剂和仪器源的积累，降低再生性牧草的发病率。似的物质叫异黄酮．它是大豆中的一大豆黄酮(Daidzein，Da)和染料种非营养成份，具有生理活性，能产生木素(Genistein，Gen)由南京农业大学4．5焚烧残茬焚烧残茬可以减少生长季节初级类似雌激素效应，而被称之为“植物雌动物生理生化实验室提供，甲醇、乙腈浸染源．焚烧也是消灭苜蓿田中菟丝激素”。衢州地处浙西，位于钱塘江上(购于MERCK

5、公司)，FA2004N型电子子危害的有效措施。游．独特的地理位置和气候优势为大天平，MIKRO一22R型冷冻离心机，4．6使用农药豆生产创造了十分有利的条件．种植AGILENT1100型高效液相色谱仪，如防治苜蓿白粉病可用40％灭菌大豆已成为该市农民增收的一条有效RE—S2A旋转蒸发器(上海荣生化仪器灵700—1000倍稀释喷雾．每隔10d1途径。目前全市全年毛豆种植面积已厂)，Florisil(佛罗里硅土)净化小柱次，或喷洒石灰硫磺合剂、多菌灵10％达3万公顷。近年来，特色生态养殖迅(Cleane~，USA)。的可湿性粉剂等：用1．5％～2％的二

6、硝猛发展。湖羊养殖已经成为农民增收1．2试验设计基邻甲苯酚和二硝基酚液进行喷洒可的重要途径。然而，草料供给不足的问1_2_1_T艺流程：大豆秸杆一干燥一以防治菟丝子的发生。题也日见突显。如何充分利用大豆秸粉碎一过筛一浸提一纯化一浓缩一测秆这一资源。大力发展秸秆畜牧业．成定。团圆为农业工作者的重要任务。1．2_2高效液相色谱条件的确定：大豆秸秆富含蛋白质、纤维素、半(1)根据已有资料I,41，色谱柱：C18反相宁夏选育出6个苜蓿主推品种纤维素及戊聚糖等成份，可被反刍动液相色谱柱(WatersXTerraMSC185宁夏地处中国内陆．属温带大陆物直接或

7、间接利用。近年来，大量研究Ixm，4．6~250mil1)；柱温：35℃；检测波性干旱、半干旱气候．无论从自然生态表明，大豆中富含大豆异黄酮(soy—长：254am；进样量：10L。比较在条件还是全国农业结构布局上都适宜isoflavone)类植物雌激素，其可促进反下述条件下，梯度洗脱和等度洗脱对发展牧草产业。但目前宁夏南部六盘刍动物生长、提高饲料利用率¨1。1，但关大豆异黄酮类物质的分离效果；(2)山山区基本以种植陇东苜蓿为主，由于大豆秸秆中异黄酮类植物雌激素含梯度洗脱条件：流动相为0．1％(v／v)于品种退化非常严重，产量低、品质差量的研究鲜有

8、报道。本研究通过对大乙酸水溶液(A)和100％甲醇(B)，流成为突出问题。通过3年多的试验研豆黄酮液相色谱检测条件和大豆秸杆速为2mlMmin，梯度洗脱为0～2min，究．宁夏农科院的专家成功筛选出综合性状表现突出的7个灌溉地苜蓿品中大豆异黄酮的提取、净化、浓缩方法27％B(v／v)；2—3rain，27％~38％B；3—种和3个旱地苜蓿品种．2013年在宁的优化，建立一套适应衢州市实际情10rain，38％B：10～12min，38％一39％夏六个不同区域开展了新品种大区试况的大豆秸杆中大豆异黄酮含量检测B；l2—14rain，39％B；14—1

9、5min，39％验展示．并示范3万亩。日前．经现场方法，并检测了衢州市野生及常规品一27％B。柱后3min；(3)等度洗脱