调控人羊膜上皮细胞aqp3表达的camp-pka信号转导通路的研究

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1、回温州医学院硕士学位论文留温州医学院硕士学位论文目录IilllIIIILIIMillIIUlY2397274一、缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1二、摘要1．中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22．英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4三、论文正文：调控人羊膜上皮细胞AQP3表．Z大的cAMP—PKA信号转导通路的研究1．前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯184．分析与讨论⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯315．小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯346．参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35四、附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38五、发表论文附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯42六、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯44七、综述：cAMP—PKA4'言号转导通路在调节胎盘滋养细胞分化中的作用⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45八、论文独创性声明和使用授权声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51缩略词表一—————————

3、————————————————————————————————————————————一英文缩写英文全称中文译文一————————————————————————————————————————————————————————一AQPAquaporin水通道蛋白AQV3DABPBScA～口PKACREBELISAAPSSDSTEN正DDMSOAcr-BisCCK．8ECLIⅡI-PCRAquaporin3DiaminobenzidinePhosphate-bufferedSalineSolution水通道蛋白3二氨基联苯胺磷酸盐缓冲液cycli

4、cadenosinemonophosphate环磷酸腺苷proteinkinaseA蛋白激酶AcAMP．responseelementbindingcA即反应元件结合蛋白proteinenzyme．1inkedimmunosorbent酶联免疫吸附法assayAmmoniumpersulfateSodiumDodecylSulfatetetramethylethylenediarninedimethylsulfoxidebisacrylamidecellcountingkit一8enhancechemiluminescencereversetra

5、nscriptionpolymerasechainreaction过硫酸铵十二烷基硫酸钠四甲基乙二胺二甲亚砜丙烯酰胺ECK一8试剂盒化学发光逆转录多聚酶链反应SPSSstatisticalpackageforsocialscience社会科学统计软件包一————————————————————————————————————————————————————————————一国温州医学院硕士学位论文调控人羊膜上皮细胞AQP3表达的cAMP-PKA信号转导通路的研究中文摘要目的：在我们的前期研究中，发现人羊膜上皮细胞水通道蛋白3(aquaporin3

6、，AQP3)的表达与羊水量异常相关，但其调控机制未明。通过研究调控人羊膜上皮细胞AQP3表达的环磷酸腺苷一蛋白激酶A(cyclicadenosinemonophosphate—proteinkinaseA，cA船一PKA)信号转导通路，明确人羊膜上皮细胞中AQP3表达的调控机制，为临床上治疗羊水量异常提供新思路。方法：(1)体外原代培养足月妊娠羊水量正常的人羊膜上皮细胞。(2)分别用廷)cAMP激动剂Forskolin处理人羊膜上皮细胞，不同浓度Forskolin(0、2．5、5、50、lOOpmol／L)作用2h和最佳浓度Forskolin不同

7、作用时间(0、l、2、10、20h)。同时加入等量的DMSO作为溶剂对照组。②PKA激动剂SP—cAMP处理人羊膜上皮细胞，不同浓度SP—cA徊(0、2．5、5、50、100pmol／L)作用2h和最佳浓度SP—cAMP不同作用时间(O、1、2、10、20h)。③PKA抑制剂H一89处理人羊膜上皮细胞，不同浓度H一89(0、5、10、50、lOOpmol／L)作用2h和最佳浓度H一89不同作用时间(O、1、2、10、20h)。以上①②③不同作用时间组设置空白对照，不同浓度组采用CCK-8法检测细胞增殖率。④最佳浓度的Forskolin+最佳浓度H

8、一89处理人羊膜上皮细胞2h。(3)采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定Forskolin、SP—cAMP和H-89作用前后入羊膜上皮细