荔枝核总皂苷对ad大鼠海马神经元的保护作用及其机制研究

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1、中图分类号：R89；R36；R39硕士学位论文荔枝核总皂苷对AD大鼠海马神经元的保护作用及其机制研究院（系）、所基础医学院研究生姓名李秀学科、专业人体解剖与组织胚胎学导师姓名余崇林教授二Ο一三年四月目录荔枝核总皂苷对AD大鼠海马神经元的保护作用及其机制研究1……………………………………………………………………11.1中文摘要…………………………………………………………11.2英文摘要…………………………………………………………61.3前言………………………………………………………………121.4材料与

2、方法………………………………………………………151.5结果………………………………………………………………291.6讨论………………………………………………………………481.7结论………………………………………………………………601.8参考文献…………………………………………………………611.9英汉缩略词对照表………………………………………………682致谢………………………………………………………………693IKKβ/NF-κB信号途径与阿尔茨海默病的关系（综述）………………………………………

3、……………………………701荔枝核总皂苷对AD大鼠海马神经元的保护作用及其机制研究摘要目的：研究荔枝核总皂苷对Aβ诱导阿尔茨海默病（AD）大鼠海马神经元损伤的抑制作用，并探讨其机制。方法：Morris水迷宫筛选学习、记忆正常的雄性SD大鼠90只，随机分为假手术组和手术组，手术组侧脑室注射10μg(2μg/1μl)聚集态Aβ25-35，假手术组注射双蒸水，术后3周，-1Morris水迷宫筛选模型成功大鼠，随机分为模型组、0.42mg·kg多奈哌-1-1-1-1-1-1齐治疗组、0.125g·kg·d、0

4、.25g·kg·d、0.51g·kg·d荔枝核总皂苷治疗组；治疗组灌胃给药，1次/日，连续4周。Morris水迷宫检测大鼠学习、记忆能力；4％多聚甲醛固定、石蜡包埋、连续冠状切片，苏木精伊红(HE)染色法和免疫组织化学（SABC法）染色，光镜下观察大鼠海马神经元损伤、Tau和iNOS的表达，Imageproplus6.0分析软件计算Tau和iNOS表达的积光密度值（IOD）；Western-blotting检测AKT、GSK-3β、NF-κB、IKKβ蛋白的表达情况。结果：⑴大鼠学习、记忆能力：与假手

5、术组比较，AD模型组大鼠逃避潜伏期显著增加(P<0.01)，跨越平台次数和平台象限停留时间明显减少（P<0.01）；与AD模型组相比，-1-1-1-1-1-1多奈哌齐治疗组、0.125g·kg·d、0.25g·kg·d、0.51g·kg·d荔枝核总皂苷治疗组均可缩短大鼠逃避潜伏期(P<0.05，P<0.01)，且增加大鼠跨越平台次数（P<0.01）、延长大鼠在平台象限停留的时间(P<0.05)；各剂量荔枝核总皂苷间相互比较，于定位航行第四、五天，大鼠逃避潜伏期差异明显(P<0.05)，跨越平台的次数在

6、低剂量和高剂量组间的差异有统计学意义（P<0.05）。⑵HE染色结果：光镜（×400）观察：假手术组大鼠2海马CA1区锥体细胞排列紧密有序，胞核大而圆，着色浅，核仁清晰，AD模型组大鼠海马神经元细胞排列疏松，胞浆浓缩、核固缩深染。多-1-1-1-1-1-1奈哌齐治疗组、0.125g·kg·d、0.25g·kg·d、0.51g·kg·d荔枝核总皂苷治疗组大鼠海马神经元变性受损现象明显改善，且随着剂量的增加，更为明显。(3)免疫组织化学染色结果：①Tau表达：光镜（×400）假手术组大鼠海马组织CA1区少

7、见细胞胞浆中沉积棕黄色颗粒，AD模型组大鼠海马组织CA1区胞浆中沉积棕黄色颗粒的细胞明显增加。多奈哌齐-1-1-1-1-1-1治疗组、0.125g·kg·d、0.25g·kg·d、0.51g·kg·d荔枝核总皂苷治疗组大鼠海马组织CA1区胞浆有棕黄色颗粒沉积的细胞明显减少，且随着剂量的增加，更为明显。Tau表达阳性染色的积光密度值，与假手术照组比较，AD模型组明显升高（P<0.01）；与AD模型组比较，多奈哌齐-1-1-1-1-1-1治疗组、0.125g·kg·d、0.25g·kg·d、0.51g·k

8、g·d荔枝核总皂苷治疗组的积光密度均降低（P<0.05）；荔枝核总皂苷三剂量治疗组间相互比较，-1-1-1-10.125g·kg·d和0.51g·kg·d治疗组间的差异有统计学意义（P<0.05）。②Nios表达：光镜（×400）假手术组大鼠海马组织CA1区少见细胞胞浆中沉积棕黄色颗粒，AD模型组大鼠海马组织CA1区胞浆中沉积棕黄色颗-1-1-1-1粒的细胞明显增加。多奈哌齐治疗组、0.125g·kg·d、0.25g·kg·d、-1-10.51g·kg·