人参皂苷对体外培养低氧海马神经元的保护作用.doc

《人参皂苷对体外培养低氧海马神经元的保护作用.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、人参皂昔对体外培养低氧海马神经元的保护作用作者：王双燕王守彪沈若武李安庆杨学伟【关键词】人参［摘要］目的观察人参皂昔（Rg2）对大鼠低氧海马神经元的保护作用及其机制。方法取新生Wistar大鼠海马神经元体外培养14d,随机分为对照组、5口mol/L尼莫地平组（尼莫地平组）、Rg20.025mmol/L组（Rg21组）、Rg20.050mmol/L组（Rg22组）。将相应药物加入到培养液中孵育4h后，连续充以体积分数0.95N2+体积分数0.05C02混合气体，建立急性低氧细胞模型。台盼蓝染色计数存活细胞，吉姆萨染色观察细胞形态，荧光分光光度计法测细胞内32+浓度。结果尼莫地平组、Rg2

2、两个剂量组的细胞死亡率均明显低于对照组，以Rg22组最低，差异均有显著性（x2=3.37,P<O.05）o海马神经元细胞内Ca2+浓度在尼莫地平组、Rg2两个剂量组均明显低于对照组，以Rg22组最低，差界均有显著性（2466.58,q二6・76~48.82,P<0.01）o结论Rg2可显著降低体外培养大鼠低氧海马神经元的细胞死亡率，其机制可能是通过减少52+内流而发挥作用。［关键词］人参皂昔；缺氧，脑；海马，神经元；钙［ABSTRACT］Object!veToinvestigatetheneuroprotectiveeffectanditsinechanismofRg2in

3、anoxicculturedhippocampalneuronalcellsinnewbornrats.MethodsAnoxicculturedhippocampalneuronalcellsofnewbornratsweredividedintocontrolgroup,nimodipinegroup(5umol/L),Rg21(0.025mmol/L)groupandRg22(0.050mmol/L)group・Theactivitiesoftheneuronsweretestedbytrypanbluestaining.Themorphologicalchangeswereob

4、servedbyGiemsastaining・TheconcentrationofcellularfreecalciuminthecellswastestedbyFluorescencespectrophotometer(Fura2)・ResuItsTnvitro,comparedwiththecontrolgroup,nimodipineandRg2significantlyincreasedtheactivitiesofhippocampalneuronalcells,decreasedtheapoptosisrateandtheconcentrationofcellularfre

5、ecalciuminthecells,andthemosteffectiveinRg20.050mmol/Lgroup・ConclusionTheRg2couldprotecthippocampalneuronalcellsagainstanoxiabydecreasingtheconcentr且tionofcellularfreecalciuminthecellstoinhibitthecelldeath・［KEYWORDS］Rg2;hypoxia,brain;hippocampus,neurons;calcium细胞凋亡是脑缺血后神经细胞死亡的主要形式［1］。目前对缺血性细胞凋亡的

6、确切机制仍不明确，有人认为，细胞质中52+含量的增加是细胞凋亡的启动因素，是激活内源性核酸内切酚降解DNA的先决条件［2］。研究结果表明，Ca2+内流导致细胞内32+超载而触发的一系列生化改变和诱导的相关基因的表达，可能是导致海马细胞损伤的重耍原因：3]o现代药理学研究证明，人参皂＜（Rg2）是人参的主要有效成分之一，有抗细胞凋亡及C&2+通道阻滞作用［4］。本实验旨在探讨Rg2对体外培养低氧海马神经元的保护作用及其机制，为缺血性脑血管病的临床治疗提供理论和实验依据。1材料和方法1.1材料1.1.1动物及来源新生Wistar大鼠20只，清洁级，由青岛市药品检验所动物实验屮心提供。1.1

7、.2主要药品与试剂及来源Rg2由吉林省中医中药研究院提供；尼莫地平购自德国拜耳公司；DMEM、马血清购口Gibco公司；胎牛血清由杭州四季青生物材料工程公司生产；多聚赖氨酸为Sigma公司产品。1.1.3主要仪器设备及来源OLYMPUS,BX50,PM20系统显微镜（日本）；PM6OLYMPUS解剖显微镜（日本）；二氧化碳细胞培养箱（上海福玛实验设备有限公司）；超净工作台（YJ型，苏州市洁净技术研究所）。1.2方法1.2.1海马神经元的培养采用