人参二醇组皂苷及人参皂苷rb1对体外培养黑色素细胞的影响

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1、人参二醇组皂苷及人参皂苷Rb1对体外培养黑色素细胞的影响：程基焱，钟桂书，韩艺，余鸿【关键词】人参二醇组皂苷；,,人参皂苷Rb1；,,黑色素细胞；,,黑色素；,,一氧化氮合酶　　摘要：目的探讨人参二醇组皂苷、人参皂苷Rb1对体外培养的黑色素细胞及黑色素合成的调节作用及机制。方法①将黑色素细胞进行体外培养、传代；用人参二醇组皂苷、人参皂苷Rb1进行干扰，观察细胞的生长情况，测量细胞OD值；②免疫组织化学技术显示黑色素细胞的一氧化氮合酶的表达的改变。结果对照组与人参二醇组皂苷实验组、人参皂苷Rb1实验组的细胞生长OD值无显著性差异（P>0.05

2、），对照组与人参二醇组皂苷实验组、人参皂苷Rb1实验组的一氧化氮合酶表达有显著性差异（P<0.05）。结论人参二醇组皂苷、人参皂苷Rb1对黑色素细胞的生长、增殖无影响，但对培养黑色素细胞一氧化氮合酶的表达具有抑制作用。　　关键词：人参二醇组皂苷；人参皂苷Rb1；黑色素细胞；黑色素；一氧化氮合酶　　TheEffectsofPanaxadiolSaponinsandGinsenosideRb1onCultivationMelanocytesinvitro　　Abstract：ObjectiveTodiscusstheeffectsandregu

3、lationmechanismofPanaxadiolsaponinsandGinsenosideRb1oncultivationmelanocytesandmelaninsynthesisinvitro.Methods①Cultureandpassagethemelanocytesinvitro；interferethemelanocyteseasuretheOD；②Displaythechangeofexpressionofnitricoxidesynthaseinthemelanocytesmunohistochemistry.Result

4、sTheODhadnosignificantdifferencebetentgroupofPanaxadiolsaponinsorGinsenosideRb1（P>0.05），theexpressionofnitricoxidesynthasehadsignificantdifferencebetentgroupofPanaxadiolsaponinsorGinsenosideRb1（P<0.05）.ConclusionThePanaxadiolsaponinsandGinsenosideRb1cannotaffectthegroel

5、anocytes,butcaninhibittheexpressionofnitricoxidesynthaseinmelanocytes.　　Keyelanocyte）相关的黄褐斑、雀斑、黑变病、妊娠斑、白癜风、白化病等疾病，美容学上黑色素（melanin）对皮肤的颜色的决定作用，都是目前医学界的一个热门话题。因此，对黑色素细胞的研究必然会对美容学和皮肤病学产生重要的影响。信使分子一氧化氮(nitricoxide；NO)是由一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase；NOS)催化产生，文献报道表明［1，2］NO供体可以促进黑色素合成增

6、加以及酪氨酸酶的活性增强，提示NO是黑色素合成的强效激活因子。所以NOS的表达可以反应黑色素细胞的功能状态。人参具有保护机体细胞和全身免受应激的影响，降低血糖和血胆固醇，促进新陈代谢等功能，目前已经广泛应用于临床的许多方面，包括在很多皮肤保健品和化妆品内［3，4］。本研究观察用人参的有效成分―人参二醇组皂苷(Panaxadiolsaponins；PDS)、人参皂苷Rb1（GinsenosideRb1）对培养黑色素细胞及细胞NOS表达的影响，目的在于阐明人参对黑色素细胞及黑色素合成的调节作用及机理，为临床应用提供实验依据。　　1材料与方法　　1.1

7、材料人参二醇组皂苷和人参皂苷Rb1；黑色素细胞株；NOS免疫组化试剂盒；1640培养基；MTT试剂；二甲亚砜；小牛血清；CO2恒温培养箱；无菌操作台；带数码相机XSJD倒置相差显微镜；细胞培养瓶、培养孔板；平板震摇仪；等。　　1.2方法与结果细胞培养和传代：细胞株复苏后，加1640培养基稀释至3×105/ml，转种于培养瓶培养。细胞以3×105/ml常规传代，倒置相差显微镜下动态观察，根据细胞生长状况和培养基颜色变化及时更换培养基或传代。实验分组与处理方法：用MTT法测定培养细胞的数量变化，以确定黑色素细胞的最佳生长时间为72h。将细胞稀释成3×

8、105/ml，接种于可拆卸式96孔板，每组12孔，每孔200μl。参照文献采用不同浓度人参二醇组皂苷和人参皂苷Rb1进行干扰并分组：对照