胰岛素样生长因子ⅱ加入心脏停搏液对大鼠离体心脏保护作用的实验研究

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1、AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterMyocardialProtectionEffectsofRecombinanthumanInsulin-·likeGrowthFactorIIinCardioplegicSolutiononIsolatedRatHeartsBySunJunhuaSupervisor：Prof．ZhaoMingyaoPathologyandPathophysiologyBasicMedicineCollegeofZhengzhouUniversityOctober2013原创性

2、声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者：≥^6羔醐：丸·步，口月叫同学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品，知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权郑州大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索

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4、sulin．1ikegrowthfactorI，IGF—I)和胰岛素样生长因子II(Insulin．1ikegrowthfactorII，IGF．II)三大类配体，除具有胰岛素样的生物学活性外，还能够发挥多功能生长因子的作用促进机体组织生长发育，并具有双向调节作用，根据发挥生物学效应的通路不同既可促进细胞增殖、分化，也可抑制细胞凋亡。其中的IGF．II可通过结合激活IGF-IR起到抑制细胞凋亡的作用，也可在心脏复灌后发挥保护心肌细胞的作用。在心脏移植手术中，，tl,脏停跳保存时的细胞凋亡影响手术的效果，改进心脏保存液配方，减轻心肌细胞凋亡和保护心脏是目前的研究热点之一。本实

5、验通过离体灌注大鼠心脏模型，研究St．Thomas’II停搏液中添加IGF-II对大鼠供心保存的保护作用及其可能的作用机制。方法16只SD大鼠随机分为St．Thomas’II(STH)停搏液组(对照组)和rh．IGF．中文摘要II+STH停搏液组(实验组)，每组8只，每lmlSTH含10ngrh．IGF．II。麻醉后开胸取出心脏迅速连于Langendorff灌注装置上，主动脉根部灌注37℃预温、pH值为7．4、以95％的02及5％C02混合气饱和的KHB缓冲液，将连有压力传感器的测压管经过左心耳、左心房、左房室瓣通入左心室，将传感器与M6240B多道生理信号采集处理系统相连

6、接，测定心室血流动力学指标。10分钟后关闭主动脉灌注，丌放左心房灌注管，转入Neely左心做功，收集冠脉流出液5分钟。对照组和实验组分别用STH停搏液和rh—IGF—II+STH停搏液作为心脏停跳液，待心脏停跳后分别放入STH液和rh．IGF—II+STH液中4。C保存3小时。将心脏重新置于Langendorff灌注装置上灌注，灌注条件与保存前保持一致。检测保存前后血流动力学指标，计算恢复率；测定冠脉流出液恢复率及其所含的心肌酶肌钙蛋白I(CardiacTroponinI．cTnI)的含量；取保存3小时后心脏左室前壁心肌组织，用荧光分析法检测心肌组织中Caspase．3含量

7、，用TUNEL法测定心肌细胞凋亡情况。采用统计软件包SPSSl6．0进行统计学分析，结果用i±S表示，各组样本均数之间采用单因素方差分析(One．wayanalysisofvariance，One．wayANOVA)，显著性水准为p<0．05。9±田：口术与对照组相比：1．实验组各血流动力学指标左心室舒张压、左心室收缩压、左心室最大压力变化速率、冠脉流出量恢复率较好，两组比较，差异具有显著性(p<0．05)；2．实验组冠脉流出液中cTnI含量O．32士O．03ng／ml，较之对照组O．374-0．02ng／ml明显