绿茶多酚对癫痫大鼠海马nf-κb,inos表达及no含量变化的影响

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2、文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：南薪丽导师签章：反钒唧2013年3月≥g日目录11Y1111211111311111131111171111116111117111111111Y2337671中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4研究论文绿茶多酚对癫痫大鼠海马NF．KB，iNOS表达及NO含量变化的影响前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7刖舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯’7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯17附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯25综述绿茶多酚研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯40个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41中文摘要绿茶多酚对癫痫大鼠海马NFKB，iNOS表达及N0含量变化的影响摘要目的：癫痫是一种以脑神经元反复过度异常放电为

4、特征的神经系统疾病。癫痫发作引起NFKB、细胞因子等炎症相关分子表达增高，炎症因子被认为与癫痫的发生频率、神经元的存活关系密切。尽管已经存在大量的抗癫痫药物，但仍没有药物能够完全治愈癫痫，而且药物的治疗作用是有限的。超过30％的癫痫患者通过药物治疗不能很好的控制癫痫发作，此外，抗癫痫药还有与之相关的各种副作用和慢性毒性。近年来，越来越多的研究关注多酚类物质的应用。绿茶多酚(greenteapolyphenols，GTPs)是绿茶的主要有效物质成分，约占绿茶干重的30％，绿茶多酚具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、抗诱变等多种功效，研究发现绿茶多酚可以减少帕金森，阿尔兹海默病等疾病的发

5、病率；但对癫痫是否有效尚未见报道。到目前为止，GTPs是否参与调节癫痫发作诱导的炎症反应鲜少报道。本研究将采用戊四氮(pentylenetetrazol，PTZ)点燃的慢性癫痫大鼠模型，并给予绿茶多酚(GTPs)干预，观察癫痫大鼠的行为学变化，运用WestemBlot方法检测海马组织胞核核因子KBp65(NFKBp65)，胞浆诱导型一氧化氮合酶(iNOS)蛋白表达量的变化，用硝酸还原酶法检测海马组织内一氧化氮(NO)含量。从而初步探讨GTPs对癫痫大鼠脑保护作用机制。方法：通过重复给予腹腔注射PTZ建立慢性点燃癫痫模型。将清洁级健康雄性Wistar大鼠(7．8周，起始体重2

6、00-J：20g)随机分为：正常对照组(NS组)、PTZ致痫组(PTZ组)和绿茶多酚干预组(GTPs组)，每组12只。NS组：大鼠隔日腹腔注射0．9％生理盐水3．5ml／kg，共13次；PTZ组：隔日腹腔注射35mg／kg的PTZ，给于PTZ前30min腹腔注射0．9％生理盐水3．5ml／kg，共13次；GTPs组：除隔日腹腔注射35mg／kg的PTZ外，每日给予50mg／kg绿茶多酚腹腔注射，于给PTZ前30rain腹腔注射绿茶多酚(50mg／kg)；每天上午08：30．09：30之间进行药物注射。PTZ和绿茶多酚用生理盐水稀释配制，每天观察给药后60min大鼠的行为学变

7、化，采用Racme评分评价癫痫大鼠发作程度，分为6级：O级：无任何反应，呈正常的行为状态；1级：面肌痉挛如眨眼、动须及节律性咀嚼等；2级：1中文摘要级加节律性点头；3级：2级加一侧前肢阵挛；4级：3级加后肢站立；5级：四级加跌倒。连续3次获得Ⅳ级或Ⅳ级以上的运动性惊厥的大鼠视为完全点燃。给药结束后24小时，将大鼠断头取脑，分离海马，运用WesternBlot方法检测海马组织胞核NF．KBp65蛋白，胞浆iNOS蛋白表达量的变化，用硝酸还原酶法检测海马组织内一氧化氮(No)含量。结果：1．行为学观察PTZ组大鼠完全点