糖基因在肝癌细胞的侵袭和耐药性中的作用

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1、中图分类号密级糖基因在肝癌细胞的侵袭和耐药性中的作用GlycogenesMediatetheInvasivePropertiesandChemosensitivityofHumanHepatocarcinomaCells计：学位论文：36页表格：1个插图：6幅指导教师：贾莉教授郭瑞申请学位级别：硕士学位学科(专业)：临床检验诊断学培养单位：大连医科大学完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已

2、经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：备晦签字日期：弘B年岁月I；日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应

3、方框内打“√”)：1．保密口，在年解密后适用本授权书。2．不保密阢作者签名：蠢嘞刷隧名‘嚯荔同期：≯，；年，月J多同同期：测乡年岁月／弓日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5一(、一)日IJ舌⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯‘(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．材料⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1细胞及培养试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2RNA提取试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3real．timePCR试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．4流式细胞仪分析试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．5RNA干扰试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．6衣霉素与PNGaseF处理实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯61．7免疫印迹分析试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．8体外侵袭实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．9体外药物敏感实验试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯71．10免疫共沉淀试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯72．仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯73．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．1细胞培养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．2RNA提取和real—timePCR⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯83．3流式细胞仪分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．4RNA干扰分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．5衣霉素处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯93．6PNGaseF处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．7免疫印迹分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．8体外侵袭实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯103．9体外药物敏感实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．10免疫共沉淀⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．11体内药物敏感性分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯113．12统计学方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯121．糖基因在MHCC97．H和MHCC97一L细胞株中的差异表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．流式细胞术分析MHCC97．H和MHCC97一L细胞与FITC．凝集素结合的能力⋯⋯123．糖基因MGAT3表达下调增强MHCC97．L细胞的侵袭力和药物敏感性⋯⋯⋯⋯⋯⋯144．糖基因MGAT5表达下调降低MHCC97一H细胞的侵袭力和药物敏感性⋯⋯⋯⋯⋯⋯145．N一糖基化修饰对M

7、HCC97一H和MHCC97．L细胞体外侵袭力和药敏性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯176．N．糖基化修饰对MHCC97．H和MHCC97．L细胞体内药敏性的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯19(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(五)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．27(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32四、攻读学位期间发表文章情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯35五、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36大连医科大学硕士学位论文糖基因在肝癌细胞的侵袭和耐药性中的作用硕士生姓名：郭瑞指导教师：贾莉教授专业名称：临床检验诊断学摘要目的：通过研究糖基因在人肝癌高转移细胞株M