壳聚糖对肝癌和肺癌细胞株糖基化作用的影响

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1、壳聚糖对肝癌和肺癌细胞株糖基化作用的影响作者：沈力，闫石，吴祁生，吴士良【摘要】目的：观察中药壳聚糖对肝癌和肺癌细胞株糖基转移酶表达的影响,探讨中药多糖在肿瘤预防和治疗的应用。方法：以浓度为50,100和200mg/L的壳聚糖分别作用于肝癌细胞株SMMC7721和肺癌细胞株A549,采用RTPCR方法检测多肽：N乙酰氨基半乳糖转移酶2（ppGalNAcT2）和β3GalT7的表达水平。结果：肝癌细胞株中ppGalNAcT2和β3GalT7仅微弱表达,加药后作用不明显；肺癌细胞株中ppGal

2、NAcT2和β3GalT7均有所表达，加入不同浓度的壳聚糖之后，ppGalNAcT2和β3GalT7的表达均受到抑制，且随着壳聚糖浓度的增加，抑制作用越明显。结论：肝癌细胞株SMMC7721和肺癌细胞株A549ppGalNAcT2和β3GalT7的表达不同，壳聚糖能够抑制肺癌细胞株A549中的糖基转移酶ppGalNAcT2和β3GalT7的表达，从而抑制了糖基化作用，对肺癌的预防和治疗具有一定的价值。【关键词】壳聚糖；肝癌；肺癌；糖基转移酶［Abstract］Objective:Toobser

3、vetheeffectofchitosantotheexpressionofdifferentglycosyltransferasesinlivercancercelllineandlungcancercelllineandtostudythe9applicationofchitosaninpreservationandtreatmentoftumor.Methods：DetecttheexpressionofppGalNAcT2andβ3GalT7inSMMC7721celllineandA

4、549celllinebyRTPCRafterchitosanaddedtotheculturemedium.Theconcentrationofchitosanwas50，100，200mg/L.Results：ThemRNAexpressionofppGalNAcT2andβ3GalT7wasinlowleverinSMMC7721celllineandtheactionwasnotobvious.ThemRNAexpressionofppGalNAcT2andβ3GalT7inA549

5、celllinewasdecreasedafterchitosanaddedtotheculturemedium.Astheincreasedofconcentration,theinhibitionwasstronger.Conclusion：ThisstudyshowedthattheexpressionofppGalNAcT2andβ3GalT7inSMMC7721celllineandA549celllinewasdifferent.TheglycosylationinA549cell

6、swasinhibitedbythechitosanthroughinhibitingtheexpressionofppGalNAcT2andβ3GalT7.Itwasgoodforpreservationandtreatmentoflungtumor.［Keywords］chitosan；livercancer;lungcancer；glycosyltransferase中药多糖广泛存在于植物、微生物(细菌和真菌)和海藻中,具有极大的医学应用价值。壳聚糖是采用甲壳素作为原料,通过脱乙酰后制成的

7、一种天然生物高分子,9是生物界大量存在的线性氨基多糖,具有广泛的药理作用，譬如抑菌作用，调脂及调节血糖作用，抗凝血作用等等。近年来有文献报道壳聚糖具有极佳的抗肿瘤作用，并且无毒副作用［1］。肿瘤细胞糖蛋白糖链结构异常与肿瘤的生物学行为,如恶性转化、转移与浸润等密切相关,而其基础是糖基转移酶的变化。因此,研究肿瘤细胞的糖基转移酶变化,有助于了解肿瘤的生物学行为机制,利于肿瘤的治疗和预防。本文观察了不同浓度壳聚糖对肝癌和肺癌细胞株糖基转移酶表达差异,以探讨糖基转移酶与肿瘤细胞浸润转移能力的关系,以及

8、壳聚糖在肿瘤治疗和预防中的作用。1材料和方法1.1试剂Trizol，MMLV逆转录酶,dNTPMIX,5×MMLV缓冲液，10×PCR缓冲液，MgCl2等均购自Invitrogen公司，六碱基随机引物购自TaKaRa公司，TaqDNA酶购自上海捷瑞生物科技有限公司。1.2细胞培养及分组肝癌细胞株SMMC97721和肺癌细胞株A549均为本室保存。壳聚糖胶囊由中科院大连化学物理研究所提供,溶于无血清的RPMI1640培养基,0.22mm孔径的滤膜过滤除菌,4℃放置备用。SMMC7721和