液相串联质谱法检测血清25羟维生素d的方法建立和临床应用

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1、万方数据复旦大学硕士研究生毕业论文THESISFORTHEMASTER、DEGREE液相串联质谱法检测血清25羟维生素D的方法建立和临床应用StudiesontheEstablishmentandClinicalApplicationofDetectionfortheserum25-hydroxyvitaminDwithLiquidChromatography-TandemMassSpectrometry系(部)医院中山医院学科、专业临床检验诊断学研究生姓名宋斌斌导师潘柏申研究员导师组成员郭玮主任技师张春燕副主任技师万方数据

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3、62目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3论文正文前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．6日Ⅱ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一6一、液相串联质谱分析法检测血清25羟维生素D的方法建立及性能评价引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯8材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯15讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18二、4种25羟维生素D检测方法的结果一致性比较引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．20材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28三、丙型肝炎患者25羟维生素D浓度水平与丙肝病毒载量和肝纤维化指数的关系分析引言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．30材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．31结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯33讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯36全文小结⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．39参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．40维生素D状态与慢性丙型肝炎病毒感染(综述)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．46致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯55万方数据液相串联质谱法检测血清巧羟维生

6、素勿的方法建立和临床应用中文摘要随着全球的临床医生们意识到维生素D缺乏的危害性，检测不同人群的维生素D水平的样本量已越来越多。25羟维生素D(25(OH)D)主要包括肝脏代谢的25羟维生素D3和25羟维生素D2两种产物，是评估机体维生素D状态的直接指标。目前主要使用免疫学的方法检测血清25(OH)D，但这类方法由于抗体的交叉反应以及不能等效的识别维生素D3和D2，导致检测的特异性、准确性和灵敏度都受到限制。采用液相串联质谱法(LC．MS／MS)能够有效的避免免疫学方法面临的各种技术问题，能够灵敏且特异的测定血清中的25(OH)D浓度。本文首先使用液相串联质谱分析仪建立了样本固相萃取一液

7、相分离一质谱分析的检测血清25(OH)D的新方法，此方法能够特异性的检测出血清样本中的25(OH)D2和25(OH)D3浓度。参照美[]FDA的生物分析方法验证导则标准对所建方法进行基本性能验证：@25(OH)D2和25(OH)D3的检测线性范围为6．25"--500nmol／L。@25(OH)D2和25(OH)D3的定量检出限分别为2．5和1．25nmol／L。③批内、批间的CV分别<4％和<6％。④回收率结果为93．26～112．16％。@DEQAS室间质评结果偏倚<1096。结果表明所建立的LC．MS／MS基本性能符合评价标准，能够灵敏且准确的检测出血清中25(OH)D2和25(

8、OH)D3的浓度。使用目前常用的3种检钡t]25(OH)D的电化学发光法(ECLIA)、微粒子酶免法(MEIA)和酶联免疫吸附发(ELISA)的免疫学方法与LC．MS／MS同时检i贝t]190份健康体检的血清样本，比较各种方法与LC．MS／MS的检测结果一致性。结果显示：QECLIA、MEIA、ELISA与LC．MS／MS的相关系数分别为O．79、O．69、0．56。QECLIA、MEIA、ELISA的25(OH)D2识别反应率分别为42．42