紫檀芪抗小鼠急性局灶性脑缺血损伤的作用及机制研究

《紫檀芪抗小鼠急性局灶性脑缺血损伤的作用及机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、厦门大学学位论文原创性声明本人呈交的学位论文是本人在导师指导F，独立完成的研究成果。本人在论文写作中参考其他个人或集体己经发表的研究成果，均在文中以适当方式明确标明，并符合法律规范和《厦门大学研究生学术活动规范(试行)》。另外，该学位论文为(龟磊)课题(组)的研究成果；获得(垒毳)课题(组)经费或实验室的资助，在‘荡礁)实验室完成。(请在以上括号内填写课题或课题组负责人或实验室名称，未有此项声明内容的，可以不作特别声明。)声明人(签名)：协莺杨≯I弓年石月争日厦门大学学位论文著作权使用声明本人同意厦门大学根据《中华人民共和国学位条例暂行实施办法》等规定保留和使用此学位论文，并向主

2、管部门或其指定机构送交学位论文(包括纸质版和电子版)，允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题和摘要汇编出版，采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。本学位论文属于：()1．经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文，于年月日解密，解密后适用上述授权。(、／)2．不保密，适用上述授权。(请在以上相应括号内打“√”或填上相应内容。保密学位论文应是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文，未经厦门大学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的，默认为公开学位论文

3、，均适用上述授权。)声明人(签名)：锄再栖刊≥年6月争日摘要脑中风是全球人口死亡的一大原因和致残率最高的疾病，其中脑缺血约占4／5。急性脑缺血的发生是由于脑组织血流阻塞引发血栓的形成，并且伴有神经学上的损伤特别是运动神经功能的损伤。然而，目前并没有神经保护作用的有效药物，需要有更多有效的靶点和治疗方法。氧化应激在脑缺血中起重要作用。活性氧(reactiveoxygenspecies，gos)在脑梗死过程中产生，引发脂质过氧化物和DNA的损伤，这也导致细胞凋亡和坏死。这些损伤发生在与运动和认知功能相关的皮层可能最终导致行为学功能上的障碍，显著的表现在转棒和平衡木行走测试评分上。氧化

4、应激还能导致脑缺血后血脑屏障(bloodbrainbarrier，BSB)的破坏，当血脑屏障收到破坏时，血管对血浆蛋白等大分子的通透性增加，引起脑水肿，加重行为学功能障碍。许多研究表明很多化合物有显著的抗氧化作用，比如，白藜芦醇，能够在局灶性脑缺血模型中显著改善脑缺血。所以，抗氧化疗法成为一个抗急性局灶性脑缺血的一个重要途径。紫檀芪为白芦藜醇的类似物，最早从紫檀木中分离得到，在蓝莓、葡萄中也有发现，具有很好地抗氧化作用。近期研究表明，紫檀芪具有神经保护及增强认知功能的作用，但其在脑缺血中是否发挥神经保护作用尚不清楚。所以，在本实验中，我们第一次通过观察神经功能的恢复及组织学的变化

5、来研究紫檀芪对局灶性脑缺血，以及紫檀芪对BBB的通透性及脑组织中的氧化应激反应的作用。本研究中，制备小鼠右侧大脑中动脉栓塞(middlecerebralarteryocclusion，MCAO)模型，90min后再灌。再灌同时及再灌后2h，给予Pte(2．5，10mg／kg，ig)。首先在小鼠急性脑缺血模型上，从行为学、组织学上评价Pet抗脑缺血的保护作用。再灌24h后，用Bederson评分、平横木、转棒实验测定小鼠神经功能缺失；TTC染色法计算脑梗死体积及水肿百分比；再灌后6h伊文思蓝(evansbluc，EB)的渗漏来评价血脑屏障(BBB)通透性的改变。其次，用组织病理学的

6、变化和生化酶学方法探索Pte抗脑缺血的机制。对组织切片的甲苯胺蓝染色观察并测定存活神经元的密度；通过TUNEL分析细胞凋亡状况；通过4．羟基壬烯醛(4一Hydroxynonenal，4-HNE)、8．羟基脱氧鸟苷(8hydroxyguanine，8-OHdG)的免疫组化来评价氧化应激程度；测定缺血后超氧化物歧化酶(superoxideDismutase，SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量。研究结果表明，脑缺血再灌注后给予Pte治疗后，在运动功能上，减少Bederson评分、增强了平衡木行走和转棒实验的表现；组织学上，剂量依赖性的减小了梗死体积并减轻

7、了水肿程度，10mg／kg剂量作用最明显。这些结果通过甲苯胺蓝和TUNEL染色，在组织病理学上得到深入验证。给予PteH⋯匕显著增加存活神经元的数量、减少细胞凋亡。脑缺血引起自由基的形成可以诱发细胞膜的脂质过氧化反应生成4．HNE，也可直接引起DNA损伤生成8．OHdG。免疫组化结果显示，Pte明显减少4．HNE和8-OhdG的阳性表达，缓解氧化应激损伤，提示Pte可减少皮层和纹状体的细胞膜和核苷酸的氧化应激反应。Pte可明显降低脑组织内MDA含量，升高脑内SOD的活性，减轻脂质