cx43在pdgf-bb诱导的大鼠血管平滑肌细胞增殖中的作用

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1、学位论文独创声明学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得直昌太堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名(手写):弓、,眵占签字日期:沙f、年e月f『Et学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解南昌大学有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文

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3、表达,并用PDGF.BB与ERKl/2特异性阻断剂PD98059处理细胞,探讨Cx43在PDGF.BB诱导的大鼠VSMCs增殖中的作用及信号通路机制。方法:1.通过脂质体将Cx43siRNA转染入大鼠胸主动脉VSMCs,使VSMCs低表达Cx43蛋白,检测沉默效率。2.MTT比色法检测各组VSMCs活性。实验分为6组:①PDGF.BB组;②Cx43siRNA+PDGF.BB组;③ScrambleRNA+PDGF.BB组;④PD98059+PDGF.BB组;(9Cx43siRNA+PD98059+PDGF.BB组;(蓟ScrambleRNA+PD9

4、8059+PDGF.BB组。下同。3.流式细胞技术检测各组VSMCs增殖率。4.Westernblot分别检测Cx43,p-Cx43,p-ERKl/2及cyclinE蛋白表达。结果:1.Westernblot结果显示,Cx43siRNA组Cx43蛋白表达为对照组的47%,提示Cx43siRNA沉默效果良好(尸

5、)。3.流式细胞技术结果显示Cx43siRNA+PDGF.BB组增殖率较PDGF.BB组显著减小(P

6、GF.BB组比Cx43siRNA+PDGF.BB组Cx43II摘要蛋白表达显著减少(尸<0.05),提示Cx43siRNA沉默效果良好,且ERKl/2途径被阻断后,Cx43蛋白表达明显下调。②PD98059+PDGF.BB组比PDGF.BB组p-Cx43蛋白表达明显降低(氏0.05),提示ERKI/2途径被阻断后,p-Cx43蛋白表达显著下调。@Cx43siRNA+PDGF.BB组比PDGF.BB组p-ERKl/2蛋白表达明显减少(尸<0.05);Cx43siI℃NA+PD98059+PDGF.BB组比Cx43siI矾A+PDGF.BB组p-ER

7、Kl/2蛋白表达显著下降(P

8、BB诱导的VSMCs增殖,显著降低p-ERKl/2和cyclinE蛋白表达。2.PD98059预处理能显著增强Cx43低表达对VSMCs

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