成体神经干细胞移植治疗大鼠脑出血实验研究

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1、中图分类号R743．34UDC610学校代码10533密级公开硕士学位论文成体神经干细胞移植治疗大鼠脑出血实验研究ExperimentalStudyonAdultNeuralStemCellsTransplantationinRatwithIntracerebralHemorrhage作者姓名学科专业研究方向学院(系、所)指导教师彭俊临床医学外科学(神经外科)湘雅医学院附属海L]医院夏鹰教授论文答辩日期：丝出15：．歹口答辩委员会主席：中南大学2013年5月原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加

2、以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：扯日期：她年j月斗日学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。

3、作者签名：二彰jL导师签名：日期：途舜』月竺日日期：雌鱼月竺日成体神经干细胞移植治疗大鼠脑出血实验研究摘要目的：评估成体神经干细胞移植治疗大鼠脑出血疗效，观察移植的成体神经干细胞在大鼠脑内分化方向。方法：①取成年大鼠海马齿状回，通过机械分离及胰酶消化法制备单细胞悬液；密度梯度离心及培养基选择法获取成体神经干细胞悬液；体外培养、鉴定及标记。②自体血纹状体注入法制作大鼠脑出血模型20只，选取LONGA评分相同的模型鼠10只，随机分为实验组(注入神经干细胞)和对照组(注入等量生理盐水)各5只，术后24小时，将体外培养并标记的大鼠成体神经干细胞通过立体定向脑实质移植法移植入大

4、鼠脑内血肿周围。③术后每周，连续7周，采用旋转实验及肢体放置实验对大鼠进行行为学测试，以观察大鼠神经功能恢复状况；7周后行免疫组化检测移植的成体神经干细胞在实验组大鼠脑内的分化方向。结果：①成体神经干细胞在体外悬浮培养时逐渐成球生艮，当克隆球直径达到160±lOum时，部分成体神经干细胞开始长出突起，克隆球中央细胞因缺乏营养开始死亡，传至第三代时，细胞仍能保持较高的增殖能力。②自体血注入大鼠脑内纹状体后，大鼠出现明显脑出血症状及体征。③成体神经干细胞移植入大鼠脑出血模型脑内后，实验组大鼠神经功能修复与对照组相比，存在显著差异(P

5、细胞BRDU／GFAP，BRDU／NEUN免疫组化双标染色阳性。结论：①成年大鼠海马齿状回颗粒下区存在可以分离提取的成体神经干细胞。②自体血纹状体注入法能获得较为稳定的脑出血模型。⑧成体神经下细胞移植入大鼠脑出血模型体内后能显著促进大鼠神经功能修复；7周后，移植的细胞能在大鼠体内分化为表达神经元及胶质细胞特异性标志物的细胞。图13幅，表2个，参考文献48篇关键词成体神经干细胞；脑出血；移植分类号R743．34ExperimentalStudyonAdultNeuralStemCellsTransplantationinRatwithIntracerebralHemor

6、rhageAbs仃actObjective：@AssessmentthecurativeeffectforadultneuralstemcellstransplantedintoSDratwithcerebralhemorrhage．@observethedifferentiationdirectionoftheANSCintherat’Sbrain．Methods：@GettheadultSDrat’Shippocampaldentategyrus，preparatethesinglecellsuspensionbymechanicalpercussionandtr

7、ypsinization；CollecttheANSCsbythewayofdensitygradientcentrifugationandspecialculturemedium．@Gettwentyratswithintracerebralhemorrhagebyinjectingtheautobloodintothestriatum，thanselecttenratswiththesamescore，randomlydivideitintotwogroupsincludingexperimentalgroupandcontrolgroup；Tw