人脐带间充质干细胞移植在颅脑损伤的作用研究

《人脐带间充质干细胞移植在颅脑损伤的作用研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获得的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北申报的专利等知识产权均归河北医科大研究生签名：参蝙师签章劫河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生躲劣名≯’翩肄

2、彩鳅访弓年弓月冲日目录JMIIIIIIIIrlllPlllllllllllllllllllJlllIY2337457中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3研究论文人脐带间充质干细胞移植在颅脑损伤的作用研究前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6刖吾⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯6材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯16附图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯19附表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯24讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．28参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯28综述人间充质干细胞经体内定植向神经样细胞分化的研究⋯⋯⋯⋯32致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯39中文摘要人脐带间充质千细胞移植在颅脑损伤的作用研究摘要目的：建立大鼠液压冲击颅脑损伤模型，探讨人脐带间充质干细胞(hu

4、manumbilicalcordmesenchymalstemcells，hUC-MSCs)移植对颅脑损伤大鼠神经功能恢复的影响以及移植细胞的存活、迁移和神经分化情况，为其在颅脑损伤治疗的应用提供理论依据。方法：取足月妊娠剖宫产健康新生儿的脐带，利用酶消化法和贴壁法获得原代细胞，传3～5代备用。收集消化后的细胞，流式细胞学检测CD45PE、CD90PE、CDl05PE、CD73PE、CDllbPE和CD34FITC、CDl9FITC，HLA-DRPE，并以小鼠IgGl．PE和小鼠IgG】．FITC作为同型对照。选取成年健康雄性Sprague—Dawley(SD)

5、大鼠，体重约2609'、一3209，制作液压冲击颅脑损伤模型。模型制备成功24小时后，采取改良神经功能评分(modifiedNeurologicalSeverityScore，mNSS)对其进行神经功能评价(Tablel)，选取评分为7～12分(中度)的50只大鼠进入实验。将其随机分为三组：(1)hUC．MSCs移植组：20只，细胞移植前用噻唑蓝[3-(4，5)一dimethylthiahiazol一2一yl一2，5一diphenytetrazoliumbromide，MaT]检测细胞活力。将第5代hUC．MSCs移植到大鼠颅脑损伤部位。(2)磷酸盐缓冲液(ph

6、osphatebufferedsaline，PBS)组：20只，用PBS替代11UC．MSCs注射到颅脑损伤部位。(3)单纯颅脑损伤：lO只，行开骨窗和颅脑损伤处理，但不移植hUC．MSCs。另外，再随机选取10只大鼠为(4)假手术组，只开骨窗，不行颅脑损伤处理，亦不行细胞移植。四组大鼠分别采用改良的神经功能评分(modifiedneurologicalseverityscore，mNSS)在hUC．MSCs移植或PBS注射后的第l天、7天、14天、21天、28天进行神经功能评分，观察其神经功能改善情况。评分结束后采用RT-PCR技术检测移植细胞胶质纤维酸性蛋白

7、(glialfibrillaryacidicprotein，OFfal')、神经元特异性烯醇化酶(neuronspecificenolase，NSE)、巢蛋白(Nestin)以及髓鞘碱性蛋l刍(myelinbasicprotein，MBP)的表达情况，并进行比较。结果：中文摘要细胞接种4---，6h后观察到少量细胞贴壁，12h以后大部分细胞贴壁。接种7d时，细胞汇合达到80％～90％，消化后按1：2或1：3的比例传代。细胞传代后，形态均一，生长迅速，3—4d可传一代。流式细胞学检测结果显示：hUC-MSCs表达间充质干细胞表面抗原CDl05、CD73、CD90，

8、不表达B型淋巴细胞表面抗