酚氧化酶原(propo)编码基因的原核表达及其体内表达水平研究

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2、文数据库》并向社会公众提供信息服务。保密论文在解密后应遵守此规定。导师签名：日符号说明Amp：ampicillin，氨苄青霉素Kan=kanamycinMonosulfate，硫酸卡那霉素cDNA：complementarydna，互补DNADEPC：diethylpyrocarbonate，焦炭酸-71酯EB：ethidiumbromide，溴化乙锭EDTA：ethylenediaminetetraaceticacid，乙二胺四乙酸kDa：kilodalton，千道尔顿RNA：ribonucleicacid，核糖核酸mRNA=messe

3、ngerrna，信使核糖核酸OD：opticaldensity，光密度PCR：polymerasechainreaction，聚合酶链式反应RT-PCR=reversetranscriptpcr，反转录聚合酶链式反应phisoelectricpoint，等电点PO：Phenoloxidase，酚氧化酶proPO：Prophenoloxidase，酚氧化酶酶原Tris：trisdroxymethyaminomethane，三羟甲基氨基甲烷IPTG：Isopropyl13-D．111iogalactopyranoside，异丙基⋯13D硫代吡

4、喃半乳糖苷AP：AmmoniumPerSulfate，过硫酸铵TEMED：N,N,N’’N’．Tetramethylethylenediamine，N,N,N’，N’一四甲基7,--胺PBS：phosphateBuffersolution，磷酸盐缓冲液NC膜：nitrocellulosefiltermembrane，硝酸纤维素膜摘要⋯⋯⋯-Abstract1前言⋯⋯目录⋯IⅢ11．1酚氧化酶研究概况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·11．1．1酚氧化酶的起源⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、11．1．2酚氧化酶的生化特性⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．1．3酚氧化酶的分子生物学研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯31．1．4酚氧化酶基因的调控概述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．1．5酚氧化酶的功能⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41．1．6酚氧化酶重组蛋白的体外表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2选题目的和意义⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·71-3本研究的技术路线⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·82材料与方法92．1试虫饲养⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·92．2试剂及仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·92．2．1主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．92．2．2试剂配制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1o2．2．3仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．3小菜蛾总RNA的提取、鉴定及cDNA合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．3．1小菜蛾总RNA的提取⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯122．3．2小菜蛾总RNA的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯132．3．3小菜蛾第一链cDNA合成⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．4PxPP01编码蛋白序列全长的克隆⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·152．4．1引物的设计⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．4．2PCR反应⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

8、．162．4．3PCR产物的纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．172．4．4转化大肠杆菌和克隆测序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．182．5