延伸蛋白2基因在仿刺参再生过程中的表达分析

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1、分类号：密级：学校代码：学号：遣掌师耗大学10165201111206硕士学位论文延伸蛋白2基因在仿刺参再生过程中的表达分析作者姓名：学科、专业：研究方向：导师姓名：梅艳丽细胞生物学海洋动物细胞生物学侯林教授2014年5月辽宁师范大学硕士学位论文学位论文独创性声明本人承诺：所呈交的学位论文是本人在导师指导下所取得的研究成果。论文中除特别加以标注和致谢的地方外，不包含他人和其他机构已经撰写或发表过的研究成果，其他同志的研究成果对本人的启示和所提供的帮助，均已在论文中做了明确的声明并表示谢意。学位论文作者签名：毕粒卜学位论文版权的使用授权书本学位

2、论文作者完全了解辽宁师范大学有关保留、使用学位论文的规定，及学校有权保留并向国家有关部门或机构送交复印件或磁盘，允许论文被查阅和借阅。本文授权辽宁师范大学，可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库并进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，并且本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后使用本授权书。学位论文作者签名：牟刍糌指导教师签名：—I叁L签名日期：■f炸∥月么Et延伸蛋白2基因在仿刺参再生过程中的表达分析摘要延伸体(elongator)是由ELPl．3核心亚体复合物和ELP4．6较小亚体复

3、合物构成的一个多蛋白复合物。在酵母和人类中，延伸体蛋白复合物具有高度的保守性。它参与RNA聚合酶Ⅱ介导的转录延伸、tRNA修饰、细胞分裂、细胞骨架构建等许多细胞调控过程，在其调控过程中起到重要作用。延伸蛋白2(ELP2)是延伸体蛋白复合物中的一员，因此在生物体中也参与着重要的生理过程，对于生物体的生长和发育起着不容忽视的重要作用。本文首次采用基因克隆(RACE)技术获得了仿刺参延伸蛋白2(Ajelp2)基因的全长cDNA序列，该全长序列包含3058bp碱基对，包括54bp5’端非编码区，526bp3’端非编码区和一个2478bp的开放阅读框编

4、码825个氨基酸。该序列的分子量是91．6kDa和等电点为5．84。通过与其他物种的序列进行比对发现，Ajetp2基因序列具有较高的保守性。通过原位杂交技术分析了Ajetp2基因在仿刺参不同组织中的表达部位，该实验结果显示Ajetp2基因在仿刺参的各组织中均有表达，尤其是在体壁和肠中的表达较强。为了检测Ajelp2基因在仿刺参的不同组织的不同再生阶段的表达量，我们使用了Real．TimePCR技术进行了检测。实验结果显示Aje勿2基因在肠和呼吸树中的表达趋势相似，都是随着组织的再生Ajetp2基因的表达量也逐渐上调，并且在15d时表达量最高，

5、随着组织恢复到正常大小，该基因的表达量也逐渐下调，最后恢复到正常水平。在体壁组织中，在再生的早期阶段Ajetp2基因表达量出现短暂且明显的上调趋势，随后表达量下调，在50min又出现明显的上调。在体壁再生的后期阶段，随着组织的再生，彳jetp2基因表达量逐渐上调，最后恢复到正常水平。上述实验结果及分析表明Ajetp2基因在仿刺参再生过程中发挥了重要的作用，对Ajelp2基因在仿刺参再生过程中的调控作用的研究为今后研究仿刺参的再生分子机制及调控通路提供了参考资料，具有一定的理论意义。同时，也为养殖者进～步了解仿刺参苗种的生产、养殖、防治及提高苗

6、种成活率等方面具有潜在的应用价值。关键词：仿刺参；Ajelp2基因；基因克隆：表达模式：再生ExpressionanalysisofApostichopusjaponicuselongatorprotein2geneduringregenerationstagesAbstractElongatorwhichconsistsofELPl—3coresubcomplexesandELP4—6smallersubcomplexesisamultiproteincomplex．ElongatoriShighlyconservativeinyeasta

7、ndhumans．IttakespartinRNApolymerase11．mediatedtranscriptionalelongation，tRNAmodification，celldivision，cytoskeletonorganizationandplaysallimportantroleintheseprocesses．Theelongatorprotein2(ELP2)isamemberoftheelongatormultiproteincomplex，therefore，italsoparticipatesinimportan

8、tphysiologicalprocessinorganisms，itisevryimportantandCan’tbeignoredinthegrowthandd