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时间:2019-03-07
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1、第12卷第f期过程工程学报~roJ.12No.120I2年2月TheChineseJournalofProcessFeb2fll2Engineering黄鳝血清转铁蛋白的提取及表征王博文。2,任天瑞“2,董亚明1,王丰。2(I.上海师范大学生命与环境科学学院;2.上海师范大学资源化学教育部震点实验室。上海200234)摘要:对从黄鳝血液中提取的蛋白层析纯化后进行生物质谱测试,确定为血清转铁蛋白.利用十二烷肇硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳、原子力显微镜、圆二色谱法对蛋白的分子量、表面形貌、二级结构进行了
2、表征,结果表明,该转铁蛋白分子鼍为74kDa,含簟为0.750mg/mL.含a一螺旋29.8%.B-折番6.6%.关键词:黄鳝;转铁蛋白;十二烷基硫酸钠一聚内烯酰胺凝胶电泳;生物质谱;原子力显微镜中图分类号:R284.2:Q956文献标识码:A文章编号:1009--606X(2012)01-0125—06条带,同时除去SDS及考马斯亮蓝,分离纯化了转铁1前言蛋白,并进行了铁离子结合实验及光谱分析,结果表明,黄鳝(Monopterusalbus)属合鳃鱼目,合鳃鱼科,黄转铁蛋白结合铁离子后的特异吸收
3、峰为467nm,说明去鳝属,亦称罗鳝、蛇鱼、长鱼,为热带及暖温带鱼类,SDS后蛋白仍具有很强的结合能力,用SDS-PAGE法主要分布于中国东南部和泰国、印度尼两亚等东南业地测得鲤血清Tf分子量约为74000Da.杨严俊等【“J采用区.黄鳝有补血补气‘1·21、消炎消毒[孔、除风湿等功固定化金属螫合亲和色谱法(IMAC)从蛋清中分离和提效.其富含二十二碳六烯酸(DHA)和卵磷脂,这些物质取卵转铁蛋I亡I(OVT),OVT纯度达96%,远高于商品是人类脑细胞生长不可缺少的营养成分l41.黄鳍所特有OV
4、T纯度,分子量为76500Da.截至目前,未见对黄的黄鳝素能调节血糖,其肉质所含脂肪极少。是糖尿病鳝体内的蛋白质进行生物质谱鉴定、原子力显微镜人、体虚、产后患者的理想食品.此外,黄鳝血还可治(AtomicForceMicroscope。AFM)表面形貌表征及圆二疗口眼歪斜,在中医药方面有很多用途.(CircularDichroism,CD)色谱测定.黄鳝在中医学领域的药用价值很大,同时随着分子黄鳝在我同南方分布广泛。人们主要足食用其肉,生物学和生物技术的飞速发展,具有生物活性的黄鳝蛋所以黄鳝血液来
5、源相对丰富且价格便宜,利用率较低,白和多肽的分离、纯化和鉴定己有报道.皮建华等【5】制是一种极为重要的天然药物开发资源,同时也是一种很各了鳝鱼抗H血清:尹绍武【6J脱察了黄鳝的红细胞,测好的药物原材料.本研究通过研究黄鳝血清蛋白,提取定了其脱氧核糖核酸(DNA)含量;李联泰等【H综述了黄具有药理活性的蛋白质化学组分,开发黄鳝的药用成鳝研究现状及其活性物质研发的前景,归纳总结了黄鳝分,提岛黄鳝的利用价值.准确测定了黄鳝血清转铁蛋遗传学、分子生物学、氮代谢及活性物质的最新研究成白的分子量及相对含量,并
6、对血清转铁蛋白进行表征,果;诸葛燕[81比较了7种淡水鱼中天然色素和酪氨酸酶首次对黄鳝体内的蛋白质进行了生物质谱鉴定、AFM的活性;Sifipan等[9J比较了亚洲鳗鱼、鳝鱼的血细胞值,表面形貌的表征及CD色谱的测定,得到的蛋白结构数并观察了其形态:李连泰【10J从全血中提取出鳝鱼凝血据可为进一步对其进行药理研究打下基础.酶,具有相当商的凝结活性.2实验血清转铁蛋(Serotransferrin,TO具有很好的增强机体免疫力的生理功能⋯】,能促进婴幼儿对铁及营养物2.1原料和仪器的吸收,能有效防止
7、贫血fl21、抑制肠道致病菌和病毒体实验材料:新鲜黄鳝购自超市;硫酸铵、聚乙二醇内自由基的生成【131、缓解类风湿关节炎和抗衰老.Tf是(Carbowax4000W)、氯化钠、三羟甲基氨基甲烷(Tris),体液中不可缺少的成分,不仅参与呼吸、细胞增殖和免十二烷基硫酸钠(sDs)、过硫酸铵、甘氨酸、巯基乙醇、疫系统的凋节,还能调节铁离子平衡和能量平衡,更具甘油、溴酚蓝、考马斯完蓝R250、甲醇、冰醋酸、氨有抗菌杀菌的保护功能114,15].龙华等I”1用硫酸铵分级沉水、氯化钾、磷酸二氢钾、浓盐酸购于
8、上海国药有限公淀法及十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳(sos—司;丙烯酰胺(Act)、双甲叉基丙烯酰胺(Bis)、四甲基乙PAGE)法获得了含鲤(Cyprinuscarpio)血清转铁蛋白的二胺溴化乙啶(TEMED)、预染色蛋白质分子量标准收稿日期:20il埘-03.修回日期:201l—12-20基金项目:国家自然科学藁金资助项H(编号:20872093):L海市教委裁金资助项目(编号}1122122):上:海『订苇点蛮验事基金资助项目(编号:07dZ22303)作者简介:撇(1
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