4外周血psa、psa+mrna联合检测在前列腺癌诊断中的临床应用new

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1、万方数据圭垡笠．处屈直堕垒，旦坠坐曼塑垒璧盒捡型查茴到退疸趁匦主数哂压应厦筮!兰超macrophages[J]．JImmunol，1991；147：4307·12．15NakamumH，YoshimuraK，MeElvaneyNG，eta1．Neutrophilelastaseinrespiratoryepithelialliningfluidofindividualswithcysiticfibrosisin-ducesinterleukin-8geneexpressioninhumanbronehiMepithelialcell·1369·line[J]．JC

2、lininues，1992；89：1478-4．[2006-04—10收稿2006-08-09修回](编辑章漂／胡国义)外周血PSA、PSAmRNA联合检测在前列腺癌诊断中的临床应用辛华马雷高英英郭宇航孙玉鸿江清林1刘国辉2(佳木斯大学附属第一医院检验科，黑龙江佳木斯154003)[摘要]目的探讨利用外周血PSA、PSAmRNA联合检测诊断前列腺癌(PCa)的临床应用及意义。方法运用酶联免疫分析和巢式RT-PCR检测22例PCa、10例良性前列腺增生(BPH)患者，5例健康男性和5例健康女性外周血中PSA、PSAmRNA的情况。结果PCa患者血清PSA的水平与l

3、

4、缶床分期、Gleason评分有关(P<0．05)，而与年龄无关(P>0．05)；夕

5、周血PSA、PSAmRNA与临床分期、内分泌治疗有关(P<0．05)，而与年龄、Gleason评分无关(P<0．05)；22例PCa标本中PSAmRNA阳性表达15例，阳性率68％，10例BPH和10例阴性对照标本无表达。结论利用外周血PSA、PSAmRNA联合检测是一种早期发现PCa微转移，判断其If蠡床变化过程、分期、预计复发和评价疗效的方法。[关键词]前列腺特异抗原；前列腺癌；前列腺增生；逆转录聚合酶链式反应[中图分类号】R735．25[文献标识码】A[文章编号]1005-9

6、202(2007)14·1369-03临床上大约有50％的前列腺癌(PCa)病人在确诊时就已经发生了转移，病变已属晚期，预后不良¨。o。国外报道血清游离PSA与外周血PSAmRNA联合检测PCa在鉴别良、恶疾病上有一定优越性H’51。国内这方面报道较少。应用RT—PCR技术检测外周血中存在的少量癌细胞，可以发现微转移，对肿瘤的复发、转移、预后及临床治疗具有指导意义¨’“。本研究采用酶联免疫技术和巢式RT—PCR技术联合检测外周血PSA和PSAmRNA，以提高PCa微转移的诊断效率、监测复发、预测肿瘤分期及预后。1材料与方法1．1病例资料PCa组：选择2005～20

7、06年佳木斯大学附属第一医院、佳木斯市中心医院门诊和住院病人。22例均为初诊PCa患者，均经前列腺穿刺病理诊断，年龄64～82岁，平均72岁。22例PCa患者中有15例接受了内分泌治疗，7例未接受。BPH组：10例均为行前列腺经尿道电切术后病理证实患者，年龄34～81岁，平均65岁。阴性对照组：5例男性健康志愿者(检测前1个月限制性生活)和5例女性健康志愿者，血液学指标均正常，年龄25～45岁，平均38岁。1．2仪器及材料Ficoll淋巴细胞分离液购自中国医学科学院天津血液病研究所，总RNA提取RNAiso试剂盒、两步法RT-PCR试剂盒购自大连生物工程有限公司，

8、引物由上海生物工程服务技术有限公司合成，PSA定量试剂盒购自美国博检生物试基金项目：佳木斯大学研究生科研创新专项基金(YJSCX2005．004JD)1佳木斯大学遗传研究所2吉林大学第一医院急诊科通讯作者：江清林(1964．)，男，研究员，硕士生导师，主要从事遗传学疾病研究。刘国辉(1965一)，男，副主任医师，主要从事急诊胃肠外科。作者简介：辛华(1970-)，女，副教授，副主任技师，硕士生导师，主要从事免疫学疾病和肿瘤疾病研究。剂有限公司。BiometraTgPCR仪：华粤企业集团有限公司；DU800核酸蛋白分析仪：Beckman公司；免疫分析仪器：DNM96

9、02G型酶标分析仪(北京普朗仪器公司)。1．3引物序列PCR引物：(1)外引物：PSA-494：5’一TAC·CCACTGCATCAGGAACA-3’：PSA-960：5’一ccrl3SGAAGCACAC—CA7I’IACA-3’。(2)内引物：PSA-559：5’一ACACAGGCCAGG—TATITCAG一3’：PSA一894：5’一GTCCAGCGTCCAGCACACAG-3’。B—actin上游：5’一cGGGA从TcGTGcGTGAcAT一3’；下游：5’一GAACTI'FGGGGGATGCTCGC．3’。扩增目的片段长度为712bp。1．4血清的提取抽

10、取空腹静脉