KLF4在肥胖相关的子宫内膜癌中的作用及机制研究.pdf

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1、分类号：R3密级：公开学号：2015200549单位代码：10759石河子大学硕士学位论文KLF4在肥胖相关的子宫内膜癌中的作用及机制研究学位申请人顾雅娟指导教师谢建新教授张君副教授申请学位门类级别理学硕士学科、专业名称生物化学与分子生物学研究方向分子遗传学所在学院医学院中国·新疆·石河子2018年6月RoleandmechanismofKLF4inthepathogenesisofobesity-associatedendometrialcarcinomaADissertationSubmittedtoShiheziUniversityInPartialFulfillment

2、oftheRequirementsfortheDegreeofMasterofNaturalScienceByGuYa-juan(BiochemistryandMolecularBiology)DisserationSupervisor:Prof.XieJian-xinProfZhangJunJune,2018摘要目的比较正常个体与子宫内膜癌（Endometrialcarcinoma，EC）患者体重、腹围、体质指数（BodyMassIndex,BMI）、血脂及血浆游离脂肪酸（FreeFattyAcid,FFA）水平的差异；分析FFA水平与癌组织中KLF4、ERα及下游癌基因/抑

3、癌基因表达之间的相关性；观察高浓度FFA对EC细胞Ishikawa中KLF4、ERα表达的影响，以及对肿瘤细胞生物学行为的影响。探讨KLF4、ERα在肥胖相关子宫内膜癌发生、发展过程中的作用。方法（1）人体组织试验：采集正常体重（BMI＜24）个体（n=60）、超重或单纯性肥胖（BMI≥24）个体（n=60）、EC患者（n=30）血浆及子宫内膜组织标本，收集患者临床病理资料。检测受试者血糖、血脂及FFA水平；qRT-PCR检测子宫内膜组织KLF4、ERα、C-erbB-2、Ki-67、P53、Bcl-2mRNA表达水平，Western-blot检测KLF4、ERα蛋白表达水平；

4、免疫组化法检测子宫内膜组织中KLF4、ERα、C-erbB-2、Ki-67、P53、Bcl-2蛋白表达水平。（2）体外细胞实验：体外培养人EC细胞Ishikawa，不同浓度FFA（棕榈酸，PA）作用EC细胞，qRT-PCR及Western-blot检测KLF4、ERαmRNA及蛋白表达水平；CCK8法检测对肿瘤细胞增殖能力的影响；划痕和Transwell实验检测对细胞迁移和侵袭能力的影响。（3）利用SPSS17.0软件进行统计学处理。结果1.人体组织实验（1）入组EC患者一般资料分析近6年来，石河子大学医学院第一附属医院收治EC患者人数呈逐年上升趋势；入组的30例肿瘤患者发病年

5、龄范围在32~80岁之间，平均发病年龄（53.97±10.96）岁，主要集中在40-59岁之间，占总患者人数的76.67%；入组患者中，超重/肥胖个体（BMI≥24）有22例，占总患者人数的73.33%。（2）正常对照个体与EC患者血脂及游离脂肪酸水平比较EC患者TC、TG和LDL水平显著高于正常体重个体；EC患者血浆FFA水平显著高于超重/肥胖及正常体重个体，差异均有统计学意义(P<0.05)。（3）子宫内膜组织KLF4、ERα及癌基因/抑癌基因mRNA及蛋白表达水平比较EC患者癌组织中，KLF4、ERα、Bcl-2mRNA及蛋白表达水平显著低于正常体重及超重/肥胖个体；P5

6、3、Ki-67、C-erbB-2mRNA表达水平显著高于正常及超重/肥胖个体，以上差异均有统计学意义（P<0.05）。免疫组织化学结果显示：KLF4、ERα、Bcl-2在EC患者癌组织表达的阳性率显著低于正常体重个体，差异有统计学意义（P<0.05）；P53、Ki-67表达的阳性率显著高于正常体重个体，差异有统计学意义（P<0.05）。I（4）EC患者血浆FFA水平、癌组织KLF4/ERα及各因子表达之间的相关性EC患者血浆中FFA的水平与癌组织中KLF4和Bcl-2mRNA表达水平显著负相关(P<0.05)；与ERαmRNA表达水平负相关(P>0.05)；与Ki-67和c-e

7、rbB-2mRNA表达水平显著正相关(P<0.05)；与P53mRNA表达水平正相关(P>0.05)。EC患者癌组织中KLF4与P53mRNA表达水平显著负相关(P<0.05)；与Ki67mRNA表达水平负相关(P＞0.05)；与Bcl-2mRNA表达水平显著正相关(P<0.05)；与ERαmRNA表达水平正相关(P＞0.05)；ERα与P53和Ki-67表达水平负相关(P＞0.05)；与C-erbB-2mRNA表达水平显著负相关(P＜0.05)；与Bcl-2mRNA表达水平正相关(P>0.