LANA通过let-7a_RBPJ信号通路抑制KSHV的裂解复制.pdf

《LANA通过let-7a_RBPJ信号通路抑制KSHV的裂解复制.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、杭州师范大学学术论文分类号：R3单位代码：10346密级：学号：2015111012034硕士学位论文中文论文题目:LANA通过let-7a/RBPJ信号通路抑制KSHV的裂解复制英文论文题目:Latency-associatednuclearantigeninhibitslyticreplicationofKaposi’ssarcoma-associatedherpesvirusbyregulatinglet-7a/RBPJsignaling申请人姓名：齐燕指导教师：杨磊合作导师：谭晓华专业名称：人体

2、解剖与组织胚胎学研究方向：分子生物学所在学院：医学院论文提交日期2018年03月杭州师范大学学术论文LANA通过let-7a/RBPJ信号通路抑制KSHV的裂解复制论文评阅人1：评阅人2：评阅人3：评阅人4：评阅人5：杭州师范大学学术论文Latency-associatednuclearantigeninhibitslyticreplicationofKaposi’ssarcoma-associatedherpesvirusbyregulatinglet-7a/RBPJsignalingExternal

3、Reviewers:杭州师范大学学术论文杭州师范大学研究生学位论文独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得杭州师范大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解杭州师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交本论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借

4、阅。本人授权杭州师范大学可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）杭州师范大学学术论文致谢致谢时光荏苒，转眼三年的研究生生活就要结束，回顾三年时光中的点点滴滴、甜酸苦辣，不禁让人感慨万千。在这三年的研究生生涯里，首先我要衷心感谢我的导师杨磊教授。杨老师三年来对我学习、生活和工作上都给予了极大的关心和帮助。从论文的选题到论文的最终完成，他都一直给予我细心的指导和不懈的支持。同时，杨老师对科研和教育

5、事业的执着、积极乐观的态度，宽广的胸怀，踏踏实实的精神都深深影响了我，他不仅在学术和科研方面教会了我很多，更重要的是教会我很多做人的道理！在此，特向杨老师致以崇高的敬意和真挚的感谢！在这里我要感谢谭晓华老师，在研究生期间他一直给予我极大的帮助和支持，为我答疑解惑，我做课题期间都给予了关怀和支持，对我论文的完成给与极大的帮助，细心指导。我还要课题组其他老师在这三年里给予我的无私关心和指导。从研究生入学考试开始到做课题期间，都最大程度的支持我，使我有足够的时间学习和实验，他们不仅任劳任怨地承担了教研室繁重的

6、教学工作，还创造了轻松愉快的工作氛围，在此向他们表示衷心的感谢！在研究生生涯即将结束之际，还要感谢我的同学及课题组同门给了我莫大的帮助和支持，最后要感谢我的父母，感谢你们一贯的支持和理解。I杭州师范大学学术论文摘要摘要背景：卡波氏肉瘤相关疱疹病毒（KSHV）是卡波氏肉瘤（KS）等疾病的病因，在感染宿主细胞内有潜伏（latent）和裂解（lytic）两个生命周期。潜伏相关核抗原（LANA）是建立和维持潜伏的关键因子和复制转录激活因子（RTA）是潜伏到裂解的开关。抑制RTA表达是LANA维持潜伏感染的重要机

7、制。宿主细胞表达的重组信号结合蛋白免疫球蛋白J区（RBPJ）与LANA结合在抑制RTA的表达中发挥了重要作用。但RBPJ表达水平是否受KSHV调控以及RBPJ表达水平与KSHV裂解复制的关系尚不清楚。目的：明确LANA对let-7a/RBPJ信号通路的影响；阐明LANA调控let-7a表达的机制以及let-7a与RBPJ的直接靶向关系；研究let-7a及RBPJ对KSHV裂解复制的影响。方法：首先采用过表达和RNA干扰技术检测LANA对let-7a/RBPJ信号通路分子表达水平的影响：脂质体法转染LAN

8、A到293T细胞，以转染相应空载体为对照，northern-blot和实时荧光定量PCR(quantativereal-timePCR,qPCR)检测let-7a的表达水平，pri-let-7afd、LIN28B、NF-κB和RBPJ的转录水平，western-blot检测LIN28B、NF-κB和RBPJ的蛋白水平；脂质体法转染si-LANA到iSLK.219细胞，以转染非特异siRNA为对照，检测上述指标。然后，采用过表达和RNA干扰技