脂联素通过mtor信号通路抑制骨肉瘤细胞增殖的机制研究

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1、万方数据中图分类号UDCR738．1610硕士学位论文学校代码!Q53三脂联素通过mToR信号通路抑制骨肉瘤细胞增殖的机制研究ThemechanismofadiponectininhibitingthedevelopmentofosteosarcomathroughmToRsignalingpathway作者姓名：庞科学科专业：临床医学研究方向：学院(系、所’)：指导教师：外科学湘雅二医院·任乐夫教授论文答辩日期a缁L羔举辩委员会主席中南大学二。一四年五月万方数据原创性声髓本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进

2、行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中南大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：丘址曰期：丑年上月毕lj学位论文版权使用授权书本人了解中南大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文并根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文?允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保存学位论文。

3、同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收录到删l国学位论文全文数据库》，并通过网络向：社会公众提供信息服务。作者签名：座雄别币签名：墼嗍：雄年一姒掣

4、{：i万方数据硕士学位论文中文摘要脂联素通过mTOR信号通路抑制骨肉瘤细胞增殖的机制研究摘要目的：本研究主要探讨人脂联素重组体通过mTOR信号通路在骨肉瘤发生、发展中的抑制作用机制以及对骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的影响，为骨肉瘤的发生、发展机制研究提供新的实验证据。方法：1、收集10例临床确诊骨肉瘤且未经化疗的患者为实验组，10例年龄、性别、体重指数相匹配的正常人为对

5、照组，分别抽取血液标本，离心后取上清，用WrestemBlot法检测其血清中脂联素(Adiponectin)的表达水平。2、对处于对数生长期的正常成骨细胞hFOBl．19及三种人骨肉瘤细胞株MG．63、SaOS．2、U20S分别提取蛋白后，WbstemBlot法检测以上四种细胞的脂联素受体1(Adiponectinreceptor1，AdipoRl)及脂联素受体2(Adiponectinreceptor2，AdipoI也)的表达水平。3、对处于对数生长期的MG．63细胞分别以lp咖l的人脂联素重组体处理不同时间，Wre

6、stemBlot法检测√6山口K、ACC蛋白磷酸化水平，确定最佳的脂联素作用时间；然后根据脂联素最佳作用时间，选择不同浓度的脂联素作用于对数生长期的MG．63细胞后，WrestemBlot法检测√6山但K、ACC、舭、ERK、S6K、4EBPl蛋白磷酸化水平并确定最佳的脂联素作用时间。4、CCK．8法检测不同浓度的人脂联素重组体对MG．63细胞增殖的影响。5、划痕法检测不同浓度的人脂联素重组体对MG一63细胞迁移能力的影响。万方数据硕士学位论文中文摘要6、对MG一63细胞予以LY294002(50岬ol／1)预刺激1小

7、时后，用人脂联素重组体以最佳作用浓度刺激该细胞24h后，对其行侵袭能力检测；同时对该细胞内Al

8、与对照组相比，经脂联素处理的MG．63细胞伽洄K、ACC磷酸化水平显著增高(P

9、联合脂联素处理后，MG-63细胞中Akt、EIⅨ、S6K、4EBPl的磷酸化水平显著下降(P<0．01)。结论：脂联素具有抑制骨肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭的作用，可能通过AMPⅪ，mTOR、P13K／Al(t／mTOR、E砌“mTOR信号通路的交互作用来实现。关键词：脂联素；骨肉瘤；mTOR；AdipoRl，AdipoR2II万方数