microrna-155对乳腺癌细胞株mda-mb-231增殖和迁移的影响及其机制研究

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1、论文题目:丛i鱼!Q坠坠:!§主过塾腿疸细胞挂迦△:迦二2三!擅蕉独适整鲍毖喧区基扭剑盟窥答辩委员会主席:塑窆鲞答辩委员会成员:梁勇隆褪贤论文答辩日期:2013.5.26温州医学院硕士学位论文目录缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..2中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..3英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..5前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..9结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..24分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..31参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.34附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..38致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..39综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..40参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯.46声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯..50Ⅲ8舢&舢』叶舢,,Ⅲ9删3舢2mⅢY温州医学院硕士学位论文缩略词表木按首字母排序2温州医学院硕士学位论文MicroRNA一155对乳腺癌细胞株MDA—MB-231增殖和迁移的影响及其机制研究中文摘要目的与背景:MicroRNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物中的,长约为19—24个核苷酸,非编码的一类单链小分子RNA。在个体发育、细胞增殖分化、凋亡、迁移侵袭、血管生成、

3、肿瘤形成等过程具有重要的调控作用。MiRNAs通过与其靶基因的3’UTR区不完全互补配对抑制靶基因的翻译,或者完全配对直接降解靶基因的mRNA。乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,近年来发病率呈明显的上升趋势。已有报道证明MiRNA-155与乳腺癌的发生发展有着密切关系,但是它的具体作用机制仍未完全清楚。本研究将继续探讨miRNA-155在乳腺癌细胞中的功能和作用机制问题,希望为乳腺癌的诊断和治疗提供理论基础。材料和方法:(1)转染技术:采用脂质体Lipofectamine2000介导的转染技术,将miRNA一155mimics和miRNA一155inhibitor转染入乳腺癌细胞

4、MDA—MB一231中,并用Real-timePCR证实转染后前后miRNA一155的表达情况。(2)MTS法:应用MTS法检测转染miRNA—155mimics和miRNA一155inhibitor后,乳腺癌细胞增殖能力的改变.(3)平板克隆形成实验:将miRNA一155mimics和miRNA一155inhibitor转染到乳腺癌细胞中,连续培养7天,观察乳腺癌细胞克隆形成能力的改变;(4)Transwell迁移试验和细胞划痕试验:观察转染miRNA一155mimics和miRNA-155inhibitor后的细胞迁移能力的改变。(5)Real—timePCR测mRNA水平的

5、表达:转染miRNA一155mimics和miRNA一155inhibitor48h后用Real—timePCR检测mRNA水平的表达改变情况。(6)Westernblot:检测转染后靶蛋白SOCSl及迁移相关蛋白MMPl6表达水平的改变。结果:(1)Real—timePCR结果显示转染后水平:实验组转染miRNA-155mimics的miRNA-155表达量较NC组明显增加,转染miRNA一155inhibitor较对照组显著降低(P均<0.05)。(2)MTS法检测结果显示:实验组转染miRNA-155mimics较NC组,增殖能力温州医学院硕士学位论文受到明显的增强,转染m

6、iRNA-155inhibitor较对照组显著降低(P均

7、5inhibitor较对照组显著降低(P均

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