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1、分类号：G804.2学校单位代码：10446硕士学位论文论文题目：IL-15抑制内质网应激改善胰岛素抵抗：研究生姓名罗立杰：学科、专业运动人体科学：研究方向运动生理学：导师姓名、职称刘洪珍教授张靓副教授：论文完成时间2013年5月1曲阜师范大学研究生学位论文原创性说明（根据学位论文类型相应地在“□”划“√”）本人郑重声明：此处所提交的博士□/硕士□论文《IL-15抑制内质网应激改善胰岛素抵抗》，是本人在导师指导下，在曲阜师范大学攻读博士□/硕士□学位期间独立进行研究工作所取得的成果。论文中除注明部分外不包含他人已经发表或撰
2、写的研究成果。对本文的研究工作做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确的方式注明。本声明的法律结果将完全由本人承担。作者签名：日期：曲阜师范大学研究生学位论文使用授权书（根据学位论文类型相应地在“□”划“√”）《IL-15抑制内质网应激改善胰岛素抵抗》系本人在曲阜师范大学攻读博士□/硕士□学位期间，在导师指导下完成的博士□/硕士□学位论文。本论文的研究成果归曲阜师范大学所有，本论文的研究内容不得以其他单位的名义发表。本人完全了解曲阜师范大学关于保存、使用学位论文的规定，同意学校保留并向有关部门送交论文的复印件和电子版本，
3、允许论文被查阅和借阅。本人授权曲阜师范大学，可以采用影印或其他复制手段保存论文，可以公开发表论文的全部或部分内容。作者签名：日期：导师签名：日期：2IL-15抑制内质网应激改善胰岛素抵抗摘要研究目的：探讨IL-15改善胰岛素抵抗的作用是否通过抑制内质网应激介导。研究方法：选取260g左右雄性SD大鼠，腹腔注射20%乌拉坦麻醉后，取比目鱼肌、腓肠肌，用刀片将组织切成25~30mg左右肌丝放入2个24孔板，加入1ml含有2%BSA的DMED液，分别用大头针将其固定使孵育时骨骼肌有一定的张力，孵育过程中持续充入混合气体（95%O
4、2，5%CO2),预孵育30min后，分别加入10ng/ml和100ng/mlIL-15，30min后按分组分别加入10ug/mLTm和10ul2mmol/LDTT，将24孔板置于水浴摇床中,45次/min震荡,并加热维持37℃恒温，3h后终止孵育，取出骨骼肌以蛋白免疫印迹方法测定比目鱼肌和腓肠肌的GRP78、GRP94、CHOP蛋白表达变化。研究结果：与对照组相比，IL-15能够明显降低Tm、DTT诱导的骨骼肌内质网应激标记蛋白GRP78、GRP94水平，改善胰岛素抵抗；能够明显降低内质网应激引起的CHOP蛋白表达水平，
5、抵制细胞凋亡。研究结论：IL-15改善胰岛素抵抗的效应可能是通过抑制内质网应激机制。关键词：IL-15；内质网应激；胰岛素抵抗；骨骼肌3InhibitionofendoplasmreticulumstressbyghrelinprotectsagainstinsulinresistanceABSTRACTObjective:InvestigatewhetherIL-15resultedinimprovinginsulinresistancethroughinhibitionofendoplasmicreticulumstr
6、ess.Methods:Selectprobably260gmaleSDrats,intraperitonealinjectionof20%urethaneafteranesthesia,anatomysoleus,gastrocnemius,thetissueswerecutintoabout25~30mgmyofilamentwithablade,placedintwo24-wellplates,add1mLDMEDcontaining2%BSA,withthepinsfixedrespectively,sothatt
7、heskeletalmusclesincubatedwithacertaintension,continuedtochargeintothegasmixture(95%O2,5%CO2)duringincubation,pre-incubatedfor30min,adding10ng/mland100ng/mlIL-15respectively,after30minaddedof10ug/mLTmand10ul2mmol/LDTT,24-wellplatesinawaterbathshaker,45times/minsho
8、ckandheattomaintainaconstanttemperatureof37℃,Terminationoftheincubationafter3h.Removeskeletalmuscledeterminationsoleusandgastrocnemiusproteinexpression:
