cd133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的实验研究

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1、上海交通大学医学院硕士学位论文CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的实验研究专业:外科学(科学学位)硕士生:蔡成研究方向:胃肠肿瘤外科及基础研究申请学位级别:硕士导师:姜波健教授培养单位:上海交通大学医学院附属第三人民医院学号:1107269587基金资助项目:国家自然科学基金(81101850);上海市卫生局重点课题(2010018);上海市科委(项目编号09411962300)2013年5月万方数据Master'sdegreethesisofShanghaijiaotonguniversityCD133PROMOTETH

2、EPROGRESSIONSOFINVASIONANDMETASTASISOFGASTRICCANCERVIAEPITHELIAL-MESENCHYMALTRANSITIONProfessionaldiscipline:surgeryName:CAIChengResearchdirection:GastrointestinalsurgeryandbasicresearchApplicationdegree:Master’sdegreeGuideteacher:ProfessorJIANGBO-jianTraininginstituti

3、on:Thethirdpeople’shospitalaffiliatedtoShanghaiJiaotongUniversitySchoolofMedicineLearnnumber:1107269587Grantfoundation:NationalNaturalScienceFoundationofChina(No.81101850);KeyProjectsofShanghaiMunicipalHealthBureau(No.2010018);ProjectsofShanghaiScienceandTechnologyComm

4、ittee(No.09411962300)May2013万方数据万方数据万方数据上海交通大学硕士学位论文CD133通过上皮间质转化促进胃癌侵袭和转移的实验研究中文摘要目的观察胃癌细胞CD133表达及上皮间质转化(EMT)相关因子与胃癌侵袭转移的关系,进一步探讨CD133是否经EMT促进胃癌侵袭与转移。材料与方法+—通过免疫磁珠分选技术,将KATO-III细胞分为CD133组和CD133组,利用Transwell小室法检测侵袭能力,Westernblot和RT-PCR方法检测EMT相关因子的表达差异以及siRNA诱导CD133基因沉默

5、后EMT相关因子表达的改变;Westernblot方法检测50例胃癌组织CD133和EMT相关因子的表达,并研究两者相关性及与胃癌临床病理特征和预后的关系。结果+—CD133KATO-III细胞组穿膜细胞数(67.66±10.47)显著高于CD133组+(13.33±6.76,P=0.001),CD133组中Snail、N-cadherinmRNA表达相对灰度值为—0.311±0.015、0.581±0.020显著高于CD133组(0.223±0.016,P=0.04;0.270±0.018,+P=0.004);CD133组中Sna

6、il、N-cadherin蛋白表达相对灰度值为0.513±0.015、—0.538±0.028,显著高于CD133组(0.179±0.023,P=0.03;0.202±0.032,P=0.02);+CD133组中E-cadherinmRNA及蛋白表达相对灰度值分别为0.231±0.009、—0.426±0.030,显著低于CD133组(0.460±0.015,P=0.04;0.748±0.027,P=0.04)。siRNA干扰CD133基因表达后,KATO-III细胞穿膜细胞数显著降低(P<0.05),Snail、N-cadheri

7、nmRNA表达相对灰度值为0.410±0.009和0.136±0.009,显著低于空白对照组(0.621±0.010,P=0.04;0.685±0.018,P=0.01)。Snail、N-cadherin蛋白表达相对灰度值为0.157±0.013和0.217±0.023,显著低于空白对照组(0.513±0.015,P=0.02;0.538±0.028,P=0.03);而与空白对照组相比(0.279±0.009,I万方数据上海交通大学硕士学位论文0.648±0.027),E-cadherinmRNA及蛋白表达相对灰度值明显增高(0.6

8、58±0.001,P=0.01;0.426±0.030,P=0.03)。胃癌组织中Snail及N-cadherin蛋白的表达与CD133表达呈正相关(P<0.05),E-cadherin的表达与CD133表达呈负相关(P<0.05),

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