国立东华大学化学研究所

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1、國立東華大學化學研究所碩士論文指導教授：蘇宏基博士序列注入線上微波水解免疫質譜法分析尿液中之嗎啡與morphine-3-glucuronideOn-linemicrowavehydrolysisandimmunoaffinityelectrospraymassspectrometryusingsequentialinjectionanalysissystemformorphineandmorphine-3-glucuronide研究生：周靜怡中華民國九十一年七月五日摘要本研究主要是利用自動化序列注入系統進行線上微波水解並連接免疫親和質譜法分析尿液中

2、之嗎啡，來取代傳統酵素或酸水解的前處理方式。此系統之設計分為兩方面，包含有封閉式與開放式之微波水解系統，且均具有自動化與節省時間之優點。另外透過此單株抗體對M3G也具親和性之特性，發展多重分析(multiresiduesanalysis)，其分析之對象為嗎啡與其代謝物Morphine-3-glucuronide（M3G）與Morphine-6-glucurronide（M6G）。封閉式之微波水解系統在微波加熱時間6秒及650W之微波功率下，M3G之水解率可達92%，嗎啡之線性範圍為100至4000ppb。在開放式之微波水解系統方面，則是在微波時間8

3、0秒及230W之微波功率下，M3G之水解率可達到95%，其嗎啡之線性範圍為200至4000ppb。至於偵測陽性煙毒犯之尿液與法定之慈濟檢測中心GC-MS之結果相比對均具有一致性。同步分析嗎啡、M3G與M6G方面，由於可省略微波水解之步驟，因此可將總分析時間縮短為12分鐘內，嗎啡之線性範圍為50至2000ppb，M3G與M6G則為300至2000ppb。嗎啡與M3G如使用Morphine-D6與M3G-D3為內標準品，不會造成互相干擾，亦不受到6-acetylmorphine與codeine之影響，因此可成功的同步分析Morphine、M3G與M6G

4、。至於偵測陽性煙毒犯之尿液與法定之慈濟檢測中心GC-MS之結果相比對具有一致性。IAbstractAnon–linemicrowavehydrolysisandimmunoaffinityelectrospraymassspectrometryusingsequentialinjectionanalysis（SIA）wasdevelopedfortheanalysisofmorphineandmorphine-glucuronidesinurine.Theurinesamplespretreatedbyoff-lineenzymeoracidhyd

5、rolysistoproducethemorphinefromitsglucuronidederivateswereherereplacedbymicrowaveassistanthydrolysisusingSIA.Thehydrolysisefficiencyofmorphine-3-glucuronide（M3G）inclosedandopenedmicrowavehydrolysissystemis92%for6sand95%for80srespectively.Thedetectionlimitofmorphineinurinewas10

6、0ppb（6s）and200ppb（80s）.Thelinearityfrom100to4000ppband200to4000ppbwereobserved,respectively.Themorphine-6-glucuronidecanbeefficientlyhydrolyzedusingthismethod.Furthermore,asystemtoanalysismorphineanditsglucuronidessimultaneouslywasdeveloped.Theaimedwastodeterminemorphineandits

7、glucuronidesderivatesbyimmunoaffinityinSIAandanalyzedbymassspectrometry.Thus,thehydrolysispretreatmentcanbeomitted.Thedetectionlimitsare50ppbformorphineand300ppbforM3GandM6G,respectively.Linearitywasobservedintheconcentrationrange50to2000ppb（morphine）and300to2000ppb（M3GandM6G）

8、Thehigherthroughputandautomationcanbeachievedbythesesystems.T