孕酮对人早孕子宫蜕膜细胞活性肾素分泌的调节

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1、206生理学报,1999年4月,51(2),206～210ActaPhysiologicaSinica一氧化氮/内皮素在大鼠胃粘膜3损伤中的作用及电针的调整效应33孙　勇　许冠荪　刘维平　许能贵(安徽中医学院针灸经络研究所生理研究室,合肥230038)摘　要用酒精灌胃引起大鼠胃粘膜损伤模型,观察内皮衍生因子(NO/ET)的含量变化和电针对胃粘膜损伤调整作用。结果发现:酒精灌胃后,胃粘膜血流量(GMBF)、跨壁电位差、血NO含量降低(P<0101),血浆ET含量和胃粘膜损伤指数(LI)增高(P<0101)。L2精氨酸(L2Arg)或硝普钠(SNP)灌注预处理后(iv),NO含量和

2、GMBF明显升高(P<0101),ET含量和LI指数下降(P<0101)。电针(EA)足三里穴位加强了以上效应,且EA效应被预先静脉灌注的NO生物合成抑制剂N2亚硝基左旋精氨酸(L2NNA)所抑制。L2NNA的抑制效应又可被与其同时灌注的L2Arg所翻转。结果提示:NO有抗胃粘膜损伤作用,电针对胃粘膜保护作用的主要效应分子可能是NO。关键词:胃粘膜损伤;一氧化氮;内皮素;电针学科分类号:Q482　　内皮衍生因子(NO/ET)是众所周知的内皮依赖的血管舒张和收缩因子,它们的生物活性相互拮抗。本实验旨在观察它们在酒精灌胃引起胃粘膜损伤中所起的作用以及NO前体、供体和L2NNA对胃粘

3、膜损伤之影响,为探求新的保护胃粘膜药物提供实验依据,并且观察电针对胃粘膜的保护作用及探讨其可能的机制。1　材料和方法111　动物与分组　　Wistar大鼠,体重150～250g,雌雄不拘,实验前禁食12h,自由饮水。随机分为10组:(1)正常对照组(control),胃内灌注1ml生理盐水。(2)模型组(mod2el,M),70%酒精灌胃致胃粘膜损伤。(3)(4)(5)组分别用L2精氨酸(L2Arg)、硝普钠(SNP)、N2亚硝基左旋精氨酸(L2NNA)于造模前15min预处理(iv),观察各指标的改变。麻醉大鼠并固定,分离大隐静脉。用PE210聚乙烯管插入大隐静脉,用电子微量

4、泵分别将L2Arg(150mg/kg)、SNP(200μg/kg)和N2亚硝基左旋精氨酸(30mg/kg)输入。L2Arg与SNP用蒸馏水分别配制成30g/L、40mg/L;L2NNA用PBS缓冲液配制成600mg/L。灌注速度为015ml/min,灌注量根据体重来计算。(6)(7)组在L2NNA大隐静脉灌注前,分别给药L2Arg、SNP,以观察对模型组各项指标的影响。(8)(9)(10)3组分别用来观察电针(EA)疗效、L2NNA对EA疗效的影响,以及L2NNA与L2Arg同时给药对EA的影响。112　药品　　L2精氨酸(L2Arg),华美生物工程公司生产;硝普钠(SNP),

5、北京制药工业研1998201221收稿　　1998205204修回　　国家攀登计划(JL293012)资助项目33联系作者©1995-2005TsinghuaTongfangOpticalDiscCo.,Ltd.Allrightsreserved.2期　　　　孙　勇等:一氧化氮/内皮素在大鼠胃粘膜损伤中的作用及电针的调整效应207究所实验药厂生产;N2亚硝基左旋精氨酸(L2NNA),Sigma公司产品。113　造模　　用戊巴比妥钠麻醉(30～40mg/kg,ip)动物。沿腹正中线切开,暴露胃,将PE210聚乙烯管插入胃内固定,输入管连接蠕动泵恒速输入70%乙醇(37℃,015～

6、016ml/[1]min)1ml,腹部缝合,30min后即可进行各项指标检测。[2]114　胃粘膜血流量(GMBF)测定　　用氢气清除法。造模后的动物腹部拆线,将铂金丝(直径100μm)电极置于胃粘膜层,参考电极置于切口处皮下,把两极连于XJY21型组织血流量微机检测仪(中国合肥机械电子工业部43所生产〕。给大鼠吸入10%左右的低浓度氢气约20s,打印机按自编程序打印出GMBF曲线,并计算大鼠GMBFml/(min·100g)。[3]115　跨壁电位差(PD)测定　　用Ag2AgCl电极直接测定法,略加修改。有效电极放于粘膜层,参考电极置于浆膜层,并读取数值,即为粘膜浆膜层间的

7、电位差(mV)。116　损伤指数(LI)评定　　将大鼠处死,向胃内注入10ml10%福尔马林,取出胃并置同[4]一浓度福尔马林中充分固定。沿胃大弯剪开,轻轻洗去胃内容物,按Guth指数评定法计算出胃粘膜损伤指数。117　血一氧化氮(NO)测定　　眼球取血2ml快速离心分离血清,于-20℃冰箱保存,测[5]定按Green法进行。118　血浆内皮素(ET)检测　　采用东亚免疫技术研究所提供的ET试剂盒检测。119　电针参数　　选用双侧足三里穴(ST236,膝部外下方),用PCE288A程控电针治