小鼠子宫蜕膜基质细胞促进树突状细胞的增殖

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1、分类号：R392.11密级：不保密UDC：610学校代码：11065硕士学位论文小鼠子宫蜕膜基质细胞促进树突状细胞的增殖李娜指导教师高美华教授学科专业名称免疫学论文答辩日期2015年05月30日摘要目的：机体的免疫系统是一个精密的反应体系，免疫应答的触发、进展和平息受到免疫系统的精确调控。免疫应答的调节机制研究是免疫学研究的重要分支，机体各器官微环境对免疫应答的调节作用不容忽视。免疫应答的主体是免疫细胞，而树突状细胞(dendriticcells,DC)作为专职抗原提呈细胞是免疫应答的中心环节，因此研究机体器官微环境对树突状细胞生物学功能的影响具有重要理论价

2、值和临床意义。正常妊娠是一个复杂的生理过程，母体的免疫系统不排斥同种异基因移植物的胚胎，且保护胚胎正常发育直至分娩，是机体免疫耐受建立的体现，说明母体对胚胎存在着精细的免疫应答和免疫调控机制，母胎耐受(maternal-fetaltolerance)的建立和维持是多种机制共同参与、互相制约、互相协调的动态平衡过程。本研究建立小鼠子宫蜕膜基质细胞（decidualstromacells,DSC）和小鼠骨髓来源的树突状细胞的细胞共培养体系，探讨子宫蜕膜基质细胞对树突状细胞增殖的影响。方法：应用白细胞介素-4（IL-4）和粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF

3、）诱导小鼠的骨髓细胞分化为树突状细胞，利用流式细胞仪（FACS）检测细胞表面分子和细胞增殖，利用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其分泌的细胞因子，构建小鼠子宫蜕膜细胞和小鼠骨髓来源的树突状细胞共培养体系模型，动态观察小鼠子宫蜕膜细胞和小鼠骨髓来源的树突状细胞增殖的影响。结果：小鼠骨髓来源树突状细胞高表达CD11c，共刺激分子CD80和CD86，MHCⅡ类分子Ia和MHCⅠ类分子H-2Kb。经脂多糖（LPS）刺激的树突状细胞分泌细胞因子IL-12(p70)、IL-6、TNFα和IL-1β的水平明显上调（P＜0.05），并能够促进抗原肽特异性T淋巴细胞增殖反应

4、能力（P＜0.05）。在小鼠子宫蜕膜细胞和小鼠骨髓来源的树突状细胞共培养10天后观察到小鼠子宫蜕膜细胞明显促进小鼠骨髓来源的树突状细胞增殖。结论：成功构建小鼠子宫蜕膜基质细胞和小鼠骨髓来源的树突状细胞共培养体系。验证了树突状细胞能够促进抗原肽特异性T细胞增殖，并探讨了小鼠子宫蜕膜基质细胞与树突状细胞相互作用的分子机制，发现小鼠子宫蜕膜基质细胞具有促进树突状细胞的增殖的能力。本研究为树突状细胞在母胎免疫耐受中所起的作用提供了实验依据，具有重要理论意义及临床应用前景。硕士研究生：李娜（免疫学）指导教师：高美华教授关键词：蜕膜基质细胞；树突状细胞；共培养；细胞增殖

5、；ABSTRACTObjective:Theimmunesystemisaprecisereactionsystem.Theinitiation,progressandcalmdownoftheimmuneresponseispreciselyregulatedbytheimmunesystem.Studiesontheregulatorymechanismsoftheimmuneresponseareimportant,anditcannotbeignoredthattheregulationoftheimmunemicroenvironmentonthe

6、immuneresponse.Immunocytearetheprincipalcomponentsoftheimmuneresponse,anddendritccells(DC)areespeciallyimportantandliesinthecentreoftheimmuneresponse.StudyoninfluenceoftheimmunemiroenvironmentonthebiologicalfunctionsofDCisveryimportant.Thepregancyisacomplicatedphysiologicalprocess,

7、andthematernalimmunesystemdonotrejecttheallogeneicfetus.Itmeansthematernalimmunesystemestablishedtheimmunetolerancetothefetus.Theestablishmentandmaintenanceofthematernal-fetaltoleranceisadynamicbalanceinvolvedbymultipalcomplicatedmechanisms.Weestablishedthemicedecidualstromacellsan

8、dbonemarrowderiveddendriti